作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2013年
12期
2162-2170
,共9页
谭秦亮%李长宁%杨丽涛%李杨瑞
譚秦亮%李長寧%楊麗濤%李楊瑞
담진량%리장저%양려도%리양서
甘蔗%SoSnRK2.1%基因克隆%原核表达
甘蔗%SoSnRK2.1%基因剋隆%原覈錶達
감자%SoSnRK2.1%기인극륭%원핵표체
Sugarcane%SoSnRK2%Gene cloning%Prokaryotic expression
蔗糖非酵解型蛋白激酶(SnRK)是植物体内ABA信号转导途径的关键调控酶,在植物的抗逆境生长过程中发挥着重要的作用.本研究利用RT-PCR和RACE-PCR技术,克隆出编码甘蔗SnRK2蛋白的基因SoSnRK2.1.该基因cDNA序列全长为1385 bp,包含一个1002 bp的开放阅读框(ORF).根据氨基酸序列预测SoSnRK2.1基因编码333个氨基酸残基,与其他高等植物中相关蛋白的氨基酸具有高度的相似性,尤其是禾本科的玉米和水稻.构建该基因的原核表达载体pET-SoSnRK2.1,在IPTG诱导下可得到38 kD左右的蛋白,与理论值一致.实时荧光定量PCR分析表明,SoSnRK2.1基因在ABA、干旱(PEG)+ABA、干旱(PEG)、NaCl、低温(4℃)和H2O2外源胁迫下均呈诱导表达的趋势.推测该基因参与调控干旱、高盐和低温等胁迫过程,在甘蔗抗逆境胁迫中起重要作用.
蔗糖非酵解型蛋白激酶(SnRK)是植物體內ABA信號轉導途徑的關鍵調控酶,在植物的抗逆境生長過程中髮揮著重要的作用.本研究利用RT-PCR和RACE-PCR技術,剋隆齣編碼甘蔗SnRK2蛋白的基因SoSnRK2.1.該基因cDNA序列全長為1385 bp,包含一箇1002 bp的開放閱讀框(ORF).根據氨基痠序列預測SoSnRK2.1基因編碼333箇氨基痠殘基,與其他高等植物中相關蛋白的氨基痠具有高度的相似性,尤其是禾本科的玉米和水稻.構建該基因的原覈錶達載體pET-SoSnRK2.1,在IPTG誘導下可得到38 kD左右的蛋白,與理論值一緻.實時熒光定量PCR分析錶明,SoSnRK2.1基因在ABA、榦旱(PEG)+ABA、榦旱(PEG)、NaCl、低溫(4℃)和H2O2外源脅迫下均呈誘導錶達的趨勢.推測該基因參與調控榦旱、高鹽和低溫等脅迫過程,在甘蔗抗逆境脅迫中起重要作用.
자당비효해형단백격매(SnRK)시식물체내ABA신호전도도경적관건조공매,재식물적항역경생장과정중발휘착중요적작용.본연구이용RT-PCR화RACE-PCR기술,극륭출편마감자SnRK2단백적기인SoSnRK2.1.해기인cDNA서렬전장위1385 bp,포함일개1002 bp적개방열독광(ORF).근거안기산서렬예측SoSnRK2.1기인편마333개안기산잔기,여기타고등식물중상관단백적안기산구유고도적상사성,우기시화본과적옥미화수도.구건해기인적원핵표체재체pET-SoSnRK2.1,재IPTG유도하가득도38 kD좌우적단백,여이론치일치.실시형광정량PCR분석표명,SoSnRK2.1기인재ABA、간한(PEG)+ABA、간한(PEG)、NaCl、저온(4℃)화H2O2외원협박하균정유도표체적추세.추측해기인삼여조공간한、고염화저온등협박과정,재감자항역경협박중기중요작용.
