中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
1期
50-53
,共4页
谭秋杉%高利荣%王晓杜%蒋昭君%沈蔷%张先福
譚鞦杉%高利榮%王曉杜%蔣昭君%瀋薔%張先福
담추삼%고리영%왕효두%장소군%침장%장선복
16S rRNA%鸭疫里默氏杆菌%PCR检测
16S rRNA%鴨疫裏默氏桿菌%PCR檢測
16S rRNA%압역리묵씨간균%PCR검측
16S rRNA%Riemerella anatipestifer%PCR assay
为建立一种快速诊断鸭疫里默氏杆菌(RA)病的方法,本研究根据NCBI登录的ATCC 11845菌株(CP003388.1)的16S rRNA基因保守序列设计引物,对标准株和疑似感染RA的病料样品进行检测,建立RA PCR检测方法.结果显示,6株RA标准株(包括1、2、10和11血清型)和2个疑似RA感染的病料样品,均能够扩增出698 bp的特异性片段,而鸭大肠杆菌和鸭沙门氏菌扩增均呈阴性.测序分析表明,疑似病料样品中扩增的片段与ATCC 11845菌株相应片段同源性达99.9％.PCR敏感性试验检测显示,其最小检出量为2.3×103 cfu/mL;应用该法对10只RA病鸭的组织样品检测显示,脑组织检出率最高,其次为心血、肝脏和脾,而肠和肌肉呈阴性.同时,PCR法对RA的检出率比细菌分离鉴定法高11.7％.本研究建立的基于16S rRNA基因序列的PCR检测方法,能够检测主要流行于浙江地区的4种血清型RA,具有特异、灵敏和快速的优点.
為建立一種快速診斷鴨疫裏默氏桿菌(RA)病的方法,本研究根據NCBI登錄的ATCC 11845菌株(CP003388.1)的16S rRNA基因保守序列設計引物,對標準株和疑似感染RA的病料樣品進行檢測,建立RA PCR檢測方法.結果顯示,6株RA標準株(包括1、2、10和11血清型)和2箇疑似RA感染的病料樣品,均能夠擴增齣698 bp的特異性片段,而鴨大腸桿菌和鴨沙門氏菌擴增均呈陰性.測序分析錶明,疑似病料樣品中擴增的片段與ATCC 11845菌株相應片段同源性達99.9％.PCR敏感性試驗檢測顯示,其最小檢齣量為2.3×103 cfu/mL;應用該法對10隻RA病鴨的組織樣品檢測顯示,腦組織檢齣率最高,其次為心血、肝髒和脾,而腸和肌肉呈陰性.同時,PCR法對RA的檢齣率比細菌分離鑒定法高11.7％.本研究建立的基于16S rRNA基因序列的PCR檢測方法,能夠檢測主要流行于浙江地區的4種血清型RA,具有特異、靈敏和快速的優點.
위건립일충쾌속진단압역리묵씨간균(RA)병적방법,본연구근거NCBI등록적ATCC 11845균주(CP003388.1)적16S rRNA기인보수서렬설계인물,대표준주화의사감염RA적병료양품진행검측,건립RA PCR검측방법.결과현시,6주RA표준주(포괄1、2、10화11혈청형)화2개의사RA감염적병료양품,균능구확증출698 bp적특이성편단,이압대장간균화압사문씨균확증균정음성.측서분석표명,의사병료양품중확증적편단여ATCC 11845균주상응편단동원성체99.9％.PCR민감성시험검측현시,기최소검출량위2.3×103 cfu/mL;응용해법대10지RA병압적조직양품검측현시,뇌조직검출솔최고,기차위심혈、간장화비,이장화기육정음성.동시,PCR법대RA적검출솔비세균분리감정법고11.7％.본연구건립적기우16S rRNA기인서렬적PCR검측방법,능구검측주요류행우절강지구적4충혈청형RA,구유특이、령민화쾌속적우점.
