中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2014年
1期
38-41
,共4页
刘丽娜%邵华斌%程国富%杨峻%张琳%谢华丽%栗绍文%罗青平
劉麗娜%邵華斌%程國富%楊峻%張琳%謝華麗%慄紹文%囉青平
류려나%소화빈%정국부%양준%장림%사화려%률소문%라청평
J亚群禽白血病%gp85基因%蛋白表达%酶联免疫吸附试验
J亞群禽白血病%gp85基因%蛋白錶達%酶聯免疫吸附試驗
J아군금백혈병%gp85기인%단백표체%매련면역흡부시험
avian leukosis virus subgroup J%gp85 gene%protein expression%ELISA
为建立检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)抗体间接ELISA方法,本实验根据已发表的ALV-Jgp85基因序列设计一对特异性引物,以该病毒cDNA为模板进行PCR扩增,将目的基因克隆于pET-28a(+)载体中,原核表达的重组蛋白约为38 ku,经western blot分析表明,重组蛋白gp85具有良好的反应原性.以纯化的重组蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA抗体检测方法,该方法对其它相关的禽类病原无交叉反应,其组内和组间的变异系数均低于13％,具有良好的重复性.对458份临床血清样品进行检测,同时用IDEXX的同类ELISA抗体检测试剂盒进行对比,总符合率达到96.29％.本研究为ALV-J的流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法.
為建立檢測J亞群禽白血病病毒(ALV-J)抗體間接ELISA方法,本實驗根據已髮錶的ALV-Jgp85基因序列設計一對特異性引物,以該病毒cDNA為模闆進行PCR擴增,將目的基因剋隆于pET-28a(+)載體中,原覈錶達的重組蛋白約為38 ku,經western blot分析錶明,重組蛋白gp85具有良好的反應原性.以純化的重組蛋白作為包被抗原建立瞭間接ELISA抗體檢測方法,該方法對其它相關的禽類病原無交扠反應,其組內和組間的變異繫數均低于13％,具有良好的重複性.對458份臨床血清樣品進行檢測,同時用IDEXX的同類ELISA抗體檢測試劑盒進行對比,總符閤率達到96.29％.本研究為ALV-J的流行病學調查提供瞭一種簡便的血清學診斷方法.
위건립검측J아군금백혈병병독(ALV-J)항체간접ELISA방법,본실험근거이발표적ALV-Jgp85기인서렬설계일대특이성인물,이해병독cDNA위모판진행PCR확증,장목적기인극륭우pET-28a(+)재체중,원핵표체적중조단백약위38 ku,경western blot분석표명,중조단백gp85구유량호적반응원성.이순화적중조단백작위포피항원건립료간접ELISA항체검측방법,해방법대기타상관적금류병원무교차반응,기조내화조간적변이계수균저우13％,구유량호적중복성.대458빈림상혈청양품진행검측,동시용IDEXX적동류ELISA항체검측시제합진행대비,총부합솔체도96.29％.본연구위ALV-J적류행병학조사제공료일충간편적혈청학진단방법.
