中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
3期
509-514
,共6页
林丽%林绍强%王晓玉%张羡
林麗%林紹彊%王曉玉%張羨
림려%림소강%왕효옥%장이
碱性成纤维细胞生长因子%人脐带间充质干细胞%Ⅰ型胶原%Ⅲ型胶原
堿性成纖維細胞生長因子%人臍帶間充質榦細胞%Ⅰ型膠原%Ⅲ型膠原
감성성섬유세포생장인자%인제대간충질간세포%Ⅰ형효원%Ⅲ형효원
目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)增殖及Ⅰ、Ⅲ型胶原产生的影响.方法:贴壁培养hUCMSCs,流式细胞术分析其表面标记(CD45、CD34、CD105、CD29和HLADR),成脂及成骨诱导其分化,以鉴定其为间充质干细胞,确定bFGF促增殖最适浓度为20 μg/L.分为实验组和对照组,实验组添加bFGF(20 μg/L)于DMED/F12培养液中,对照组使用DMED/F12常规培养液.MTT法测定hUCMSCs存活和增殖能力,分析bFGF对hUCMSCs增殖的影响,RT-PCR测定其Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的变化；Westem blotting测定其Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的含量.结果:MTT生长曲线提示bFGF促进hUCMSCs的增殖.用含与不含bFGF培养基培养的hUCMSCs均表达CD29,不表达CD34、CD45和HLA-DR,油红O染色和茜素红染色阳性.RT-PCR结果显示了实验组Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达较对照组减少(P＜0.05).Western blotting检测结果显示了实验组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达较对照组减少(P＜0.05).结论:bFGF可显著促进hUCMSCs增殖,且不改变细胞的表面标志物表达.bFGF对hUCMSCs I、Ⅲ型胶原mRNA和蛋白的表达呈抑制效应,提示其在促进创面愈合的同时可能不会引起Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白沉积,从而减少瘢痕增生.
目的:觀察堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)對人臍帶間充質榦細胞(hUCMSCs)增殖及Ⅰ、Ⅲ型膠原產生的影響.方法:貼壁培養hUCMSCs,流式細胞術分析其錶麵標記(CD45、CD34、CD105、CD29和HLADR),成脂及成骨誘導其分化,以鑒定其為間充質榦細胞,確定bFGF促增殖最適濃度為20 μg/L.分為實驗組和對照組,實驗組添加bFGF(20 μg/L)于DMED/F12培養液中,對照組使用DMED/F12常規培養液.MTT法測定hUCMSCs存活和增殖能力,分析bFGF對hUCMSCs增殖的影響,RT-PCR測定其Ⅰ、Ⅲ型膠原mRNA的變化；Westem blotting測定其Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的含量.結果:MTT生長麯線提示bFGF促進hUCMSCs的增殖.用含與不含bFGF培養基培養的hUCMSCs均錶達CD29,不錶達CD34、CD45和HLA-DR,油紅O染色和茜素紅染色暘性.RT-PCR結果顯示瞭實驗組Ⅰ、Ⅲ型膠原mRNA錶達較對照組減少(P＜0.05).Western blotting檢測結果顯示瞭實驗組Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的錶達較對照組減少(P＜0.05).結論:bFGF可顯著促進hUCMSCs增殖,且不改變細胞的錶麵標誌物錶達.bFGF對hUCMSCs I、Ⅲ型膠原mRNA和蛋白的錶達呈抑製效應,提示其在促進創麵愈閤的同時可能不會引起Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白沉積,從而減少瘢痕增生.
목적:관찰감성성섬유세포생장인자(bFGF)대인제대간충질간세포(hUCMSCs)증식급Ⅰ、Ⅲ형효원산생적영향.방법:첩벽배양hUCMSCs,류식세포술분석기표면표기(CD45、CD34、CD105、CD29화HLADR),성지급성골유도기분화,이감정기위간충질간세포,학정bFGF촉증식최괄농도위20 μg/L.분위실험조화대조조,실험조첨가bFGF(20 μg/L)우DMED/F12배양액중,대조조사용DMED/F12상규배양액.MTT법측정hUCMSCs존활화증식능력,분석bFGF대hUCMSCs증식적영향,RT-PCR측정기Ⅰ、Ⅲ형효원mRNA적변화；Westem blotting측정기Ⅰ、Ⅲ형효원단백적함량.결과:MTT생장곡선제시bFGF촉진hUCMSCs적증식.용함여불함bFGF배양기배양적hUCMSCs균표체CD29,불표체CD34、CD45화HLA-DR,유홍O염색화천소홍염색양성.RT-PCR결과현시료실험조Ⅰ、Ⅲ형효원mRNA표체교대조조감소(P＜0.05).Western blotting검측결과현시료실험조Ⅰ、Ⅲ형효원단백적표체교대조조감소(P＜0.05).결론:bFGF가현저촉진hUCMSCs증식,차불개변세포적표면표지물표체.bFGF대hUCMSCs I、Ⅲ형효원mRNA화단백적표체정억제효응,제시기재촉진창면유합적동시가능불회인기Ⅰ、Ⅲ형효원단백침적,종이감소반흔증생.
