中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
12期
24-26
,共3页
谢秀兰%康晓冬%储岳峰%马小明%岳彩娟
謝秀蘭%康曉鼕%儲嶽峰%馬小明%嶽綵娟
사수란%강효동%저악봉%마소명%악채연
羊丝状支原体簇%LAMP%诊断
羊絲狀支原體簇%LAMP%診斷
양사상지원체족%LAMP%진단
本试验利用环介导等温扩增技术(LAMP)建立了羊丝状支原体簇的快速检测方法,该方法以羊丝状支原体簇成员的保守性基因16S rRNA为靶序列,设计了4条特异性引物,在65℃等温条件下,60 min一步完成反应.在反应管中预先添加羟基萘酚蓝(HNB),阳性呈蓝色,阴性呈紫色.丝状支原体簇成员——丝状支原体山羊亚种(Mmc)、丝状支原体丝状亚种LC型(Mmm LC)、山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)的LAMP检测为阳性;对其他病原菌没有交叉反应.以Mmc的核酸为模板进行灵敏度检测,LAMP的最低检出限为10 pg/μL.结果表明,本试验建立了一种特异、敏感、快速、简便的羊丝状支原体簇的LAMP方法.
本試驗利用環介導等溫擴增技術(LAMP)建立瞭羊絲狀支原體簇的快速檢測方法,該方法以羊絲狀支原體簇成員的保守性基因16S rRNA為靶序列,設計瞭4條特異性引物,在65℃等溫條件下,60 min一步完成反應.在反應管中預先添加羥基萘酚藍(HNB),暘性呈藍色,陰性呈紫色.絲狀支原體簇成員——絲狀支原體山羊亞種(Mmc)、絲狀支原體絲狀亞種LC型(Mmm LC)、山羊支原體山羊肺炎亞種(Mccp)的LAMP檢測為暘性;對其他病原菌沒有交扠反應.以Mmc的覈痠為模闆進行靈敏度檢測,LAMP的最低檢齣限為10 pg/μL.結果錶明,本試驗建立瞭一種特異、敏感、快速、簡便的羊絲狀支原體簇的LAMP方法.
본시험이용배개도등온확증기술(LAMP)건립료양사상지원체족적쾌속검측방법,해방법이양사상지원체족성원적보수성기인16S rRNA위파서렬,설계료4조특이성인물,재65℃등온조건하,60 min일보완성반응.재반응관중예선첨가간기내분람(HNB),양성정람색,음성정자색.사상지원체족성원——사상지원체산양아충(Mmc)、사상지원체사상아충LC형(Mmm LC)、산양지원체산양폐염아충(Mccp)적LAMP검측위양성;대기타병원균몰유교차반응.이Mmc적핵산위모판진행령민도검측,LAMP적최저검출한위10 pg/μL.결과표명,본시험건립료일충특이、민감、쾌속、간편적양사상지원체족적LAMP방법.
