中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
12期
60-63
,共4页
禽白血病病毒%逆转录套式PCR%检测
禽白血病病毒%逆轉錄套式PCR%檢測
금백혈병병독%역전록투식PCR%검측
本试验根据GenBank中登录的禽白血病病毒(ALV)基因组序列,设计合成了2对引物,外部引物的扩增片段大小为478 bp,内部引物的扩增片段大小为314 bp,建立了适合ALV快速检测的套式PCR方法(nested-PCR).采用该方法对ALV毒株进行了检测,试验结果表明,能扩增到314 bp的条带,禽流感病毒(H9亚型)、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、减蛋综合征病毒、禽网状内皮增生病病毒、禽呼肠孤病毒、马立克氏病病毒的扩增结果均为阴性.该方法第1次扩增的敏感性是100 pg,第2次扩增的敏感性是1 fg,第2次比第1次扩增的敏感性高105倍.所建立的套式PCR方法具有敏感性高、重复性好、特异性强等优点,可用于禽白血病病毒(ALV)的临床诊断和分子流行病学调查等.
本試驗根據GenBank中登錄的禽白血病病毒(ALV)基因組序列,設計閤成瞭2對引物,外部引物的擴增片段大小為478 bp,內部引物的擴增片段大小為314 bp,建立瞭適閤ALV快速檢測的套式PCR方法(nested-PCR).採用該方法對ALV毒株進行瞭檢測,試驗結果錶明,能擴增到314 bp的條帶,禽流感病毒(H9亞型)、新城疫病毒、傳染性法氏囊病病毒、減蛋綜閤徵病毒、禽網狀內皮增生病病毒、禽呼腸孤病毒、馬立剋氏病病毒的擴增結果均為陰性.該方法第1次擴增的敏感性是100 pg,第2次擴增的敏感性是1 fg,第2次比第1次擴增的敏感性高105倍.所建立的套式PCR方法具有敏感性高、重複性好、特異性彊等優點,可用于禽白血病病毒(ALV)的臨床診斷和分子流行病學調查等.
본시험근거GenBank중등록적금백혈병병독(ALV)기인조서렬,설계합성료2대인물,외부인물적확증편단대소위478 bp,내부인물적확증편단대소위314 bp,건립료괄합ALV쾌속검측적투식PCR방법(nested-PCR).채용해방법대ALV독주진행료검측,시험결과표명,능확증도314 bp적조대,금류감병독(H9아형)、신성역병독、전염성법씨낭병병독、감단종합정병독、금망상내피증생병병독、금호장고병독、마립극씨병병독적확증결과균위음성.해방법제1차확증적민감성시100 pg,제2차확증적민감성시1 fg,제2차비제1차확증적민감성고105배.소건립적투식PCR방법구유민감성고、중복성호、특이성강등우점,가용우금백혈병병독(ALV)적림상진단화분자류행병학조사등.
