中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
12期
1-5
,共5页
夏吉瀚%王超群%阮进学%杨述林%李奎
夏吉瀚%王超群%阮進學%楊述林%李奎
하길한%왕초군%원진학%양술림%리규
11β-HSD1%真核表达%基因克隆%载体构建%转基因
11β-HSD1%真覈錶達%基因剋隆%載體構建%轉基因
11β-HSD1%진핵표체%기인극륭%재체구건%전기인
11β-羟类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)可使无生物活性的皮质酮催化为有活性的皮质醇,本试验利用长白猪肝脏组织提取的RNA反转录出11β-HSD1基因的cDNA,通过反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和DNA重组技术,将11β-HSD1基因构建到pcDNA3.1真核表达载体上,构建了11β-HSD1-pcDNA重组质粒.通过PCR扩增、酶切电泳和测序分析的方法对重组的质粒进行了鉴定,并将其转染了Hepa1-6细胞,通过RT-PCR检测了其过表达强度.试验结果表明,成功构建了猪11β-HSD1-pcDNA真核过表达载体,为转基因动物的研究奠定了基础.
11β-羥類固醇脫氫酶1(11β-HSD1)可使無生物活性的皮質酮催化為有活性的皮質醇,本試驗利用長白豬肝髒組織提取的RNA反轉錄齣11β-HSD1基因的cDNA,通過反轉錄—聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)技術和DNA重組技術,將11β-HSD1基因構建到pcDNA3.1真覈錶達載體上,構建瞭11β-HSD1-pcDNA重組質粒.通過PCR擴增、酶切電泳和測序分析的方法對重組的質粒進行瞭鑒定,併將其轉染瞭Hepa1-6細胞,通過RT-PCR檢測瞭其過錶達彊度.試驗結果錶明,成功構建瞭豬11β-HSD1-pcDNA真覈過錶達載體,為轉基因動物的研究奠定瞭基礎.
11β-간류고순탈경매1(11β-HSD1)가사무생물활성적피질동최화위유활성적피질순,본시험이용장백저간장조직제취적RNA반전록출11β-HSD1기인적cDNA,통과반전록—취합매련식반응(RT-PCR)기술화DNA중조기술,장11β-HSD1기인구건도pcDNA3.1진핵표체재체상,구건료11β-HSD1-pcDNA중조질립.통과PCR확증、매절전영화측서분석적방법대중조적질립진행료감정,병장기전염료Hepa1-6세포,통과RT-PCR검측료기과표체강도.시험결과표명,성공구건료저11β-HSD1-pcDNA진핵과표체재체,위전기인동물적연구전정료기출.
