CAJ | 학술논문

目的 nephrin磷酸化在维持正常足细胞结构和功能上起重要作用.糖皮质激素是治疗原发性肾小球疾病蛋白尿的最常见药物.本研究观察地塞米松(dexamethasone,Dex)对体外培养足细胞nephrin磷酸化的影响.方法体外培养的足细胞给予不同浓度Dex(0、1、10、100nmol/L)处理24h,100nmol/L Dex处理足细胞不同时间(0、12、24、36h),Dex (100nmol/L)与足细胞一起培养,分别加入糖皮质激素受体拮抗剂及盐皮质激素受体拮抗剂,小干扰RNA(siRNA)沉默Nck或Fyn的表达,采用抗pY1228 nephrin抗体应用免疫印迹分别测定nephrin磷酸化水平的表达变化.结果 10、100nmol/L Dex处理足细胞明显增加nephrin的磷酸化,100nmol/L Dex与足细胞孵育24、36h明显增加nephrin的磷酸化,100nmol/L Dex与足细胞孵育24h导致nephrin磷酸化明显增加,这种增加可被糖皮质激素受体拮抗剂所抑制,但不被盐皮质激素受体拮抗剂所抑制.100nmol/L Dex与足细胞孵育24h导致nephrin磷酸化明显增加,加siRNA沉默Nck或Fyn,前者可部分抑制nephrin磷酸化增加,后者完全抑制nephrin磷酸化.结论糖皮质激素可增加nephrin的磷酸化,糖皮质激素治疗人类肾小球疾病可能通过调节Nck和Fyn复合物促进nephrin磷酸化实现,这种作用可能阐明了糖皮质激素治疗肾病新的机制.
목적 nephrin린산화재유지정상족세포결구화공능상기중요작용.당피질격소시치료원발성신소구질병단백뇨적최상견약물.본연구관찰지새미송(dexamethasone,Dex)대체외배양족세포nephrin린산화적영향.방법 체외배양적족세포급여불동농도Dex(0、1、10、100nmol/L)처리24h,100nmol/L Dex처리족세포불동시간(0、12、24、36h),Dex (100nmol/L)여족세포일기배양,분별가입당피질격소수체길항제급염피질격소수체길항제,소간우RNA(siRNA)침묵Nck혹Fyn적표체,채용항pY1228 nephrin항체응용면역인적분별측정nephrin린산화수평적표체변화.결과 10、100nmol/L Dex처리족세포명현증가nephrin적린산화,100nmol/L Dex여족세포부육24、36h명현증가nephrin적린산화,100nmol/L Dex여족세포부육24h도치nephrin린산화명현증가,저충증가가피당피질격소수체길항제소억제,단불피염피질격소수체길항제소억제.100nmol/L Dex여족세포부육24h도치nephrin린산화명현증가,가siRNA침묵Nck혹Fyn,전자가부분억제nephrin린산화증가,후자완전억제nephrin린산화.결론 당피질격소가증가nephrin적린산화,당피질격소치료인류신소구질병가능통과조절Nck화Fyn복합물촉진nephrin린산화실현,저충작용가능천명료당피질격소치료신병신적궤제.