南昌大学学报（医学版）
南昌大學學報（醫學版）
남창대학학보（의학판）
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE JIANGXI
2013年
12期
21-25,36
,共6页
秦艳东%秦晓华%房向东%涂卫平
秦豔東%秦曉華%房嚮東%塗衛平
진염동%진효화%방향동%도위평
白蛋白%肾小管上皮细胞转分化%整合素连接激酶%肾脏病,慢性%肾小管间质纤维化
白蛋白%腎小管上皮細胞轉分化%整閤素連接激酶%腎髒病,慢性%腎小管間質纖維化
백단백%신소관상피세포전분화%정합소련접격매%신장병,만성%신소관간질섬유화
目的 探讨整合素连接激酶(ILK)在白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化(TMET)过程中的表达及其意义.方法 将体外培养的人近端肾小管上皮细胞株HK-2细胞随机分为4组:1)空白对照组.仅加入DMEM/F12培养基培养细胞.2)白蛋白诱导组.加入含人纯化白蛋白的培养液,白蛋白终浓度为5cg·L-1(以下白蛋白终浓度为此浓度).3)转化生长因子-β1(TGF-β1)中和抗体对照组.加入含TGF-β1中和抗体的培养液,TGF-β1中和抗体终浓度为5 μg·L-1(以下TGF-β1中和抗体终浓度为此浓度).4)TGF-β1拮抗组.在加入人纯化白蛋白 15 min 前加入TGF-β1中和抗体.观察4组细胞形态的变化.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TGF-β1、ILK、纤维连接蛋白(FN)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)omRNA表达水平.结果空白对照组0、12、24和48 h时TGF-β1、ILK、E-cadherin、α-SMA和FN mRNA表达水平与TGF-β1中和抗体对照组比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).白蛋白诱导组、TGF-β1拮抗组12、24和48 h时TGF-β1、ILK、E-cadherin、α-SMA和FN mRNA表达水平均明显高于同组0 h时、空白对照组和TGF-β1中和抗体对照组(均P＜0.05);TGF-β1拮抗组12、24和48 h时TGF-β1、ILK和FN mRNA表达水平均显著低于白蛋白诱导组(均P＜0.01),24、48 h时E-cadherin、α-SMA mRNA表达水平均显著低于白蛋白诱导组(均P＜0.01).相关性分析结果显示,ILK mRNA表达与TGF-β1、α-SMA和FN mRNA表达均呈正相关(r=0.944、0.974和0.989,均P＜0.01).结论白蛋白可以诱导HK-2细胞发生转分化,ILK在其中发挥促进作用.
目的 探討整閤素連接激酶(ILK)在白蛋白誘導人腎小管上皮細胞轉分化(TMET)過程中的錶達及其意義.方法 將體外培養的人近耑腎小管上皮細胞株HK-2細胞隨機分為4組:1)空白對照組.僅加入DMEM/F12培養基培養細胞.2)白蛋白誘導組.加入含人純化白蛋白的培養液,白蛋白終濃度為5cg·L-1(以下白蛋白終濃度為此濃度).3)轉化生長因子-β1(TGF-β1)中和抗體對照組.加入含TGF-β1中和抗體的培養液,TGF-β1中和抗體終濃度為5 μg·L-1(以下TGF-β1中和抗體終濃度為此濃度).4)TGF-β1拮抗組.在加入人純化白蛋白 15 min 前加入TGF-β1中和抗體.觀察4組細胞形態的變化.採用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)法檢測TGF-β1、ILK、纖維連接蛋白(FN)、E-鈣黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)omRNA錶達水平.結果空白對照組0、12、24和48 h時TGF-β1、ILK、E-cadherin、α-SMA和FN mRNA錶達水平與TGF-β1中和抗體對照組比較差異均無統計學意義(均P＞0.05).白蛋白誘導組、TGF-β1拮抗組12、24和48 h時TGF-β1、ILK、E-cadherin、α-SMA和FN mRNA錶達水平均明顯高于同組0 h時、空白對照組和TGF-β1中和抗體對照組(均P＜0.05);TGF-β1拮抗組12、24和48 h時TGF-β1、ILK和FN mRNA錶達水平均顯著低于白蛋白誘導組(均P＜0.01),24、48 h時E-cadherin、α-SMA mRNA錶達水平均顯著低于白蛋白誘導組(均P＜0.01).相關性分析結果顯示,ILK mRNA錶達與TGF-β1、α-SMA和FN mRNA錶達均呈正相關(r=0.944、0.974和0.989,均P＜0.01).結論白蛋白可以誘導HK-2細胞髮生轉分化,ILK在其中髮揮促進作用.
목적 탐토정합소련접격매(ILK)재백단백유도인신소관상피세포전분화(TMET)과정중적표체급기의의.방법 장체외배양적인근단신소관상피세포주HK-2세포수궤분위4조:1)공백대조조.부가입DMEM/F12배양기배양세포.2)백단백유도조.가입함인순화백단백적배양액,백단백종농도위5cg·L-1(이하백단백종농도위차농도).3)전화생장인자-β1(TGF-β1)중화항체대조조.가입함TGF-β1중화항체적배양액,TGF-β1중화항체종농도위5 μg·L-1(이하TGF-β1중화항체종농도위차농도).4)TGF-β1길항조.재가입인순화백단백 15 min 전가입TGF-β1중화항체.관찰4조세포형태적변화.채용역전록-취합매련반응(RT-PCR)법검측TGF-β1、ILK、섬유련접단백(FN)、E-개점단백(E-cadherin)화α-평활기기동단백(α-SMA)omRNA표체수평.결과공백대조조0、12、24화48 h시TGF-β1、ILK、E-cadherin、α-SMA화FN mRNA표체수평여TGF-β1중화항체대조조비교차이균무통계학의의(균P＞0.05).백단백유도조、TGF-β1길항조12、24화48 h시TGF-β1、ILK、E-cadherin、α-SMA화FN mRNA표체수평균명현고우동조0 h시、공백대조조화TGF-β1중화항체대조조(균P＜0.05);TGF-β1길항조12、24화48 h시TGF-β1、ILK화FN mRNA표체수평균현저저우백단백유도조(균P＜0.01),24、48 h시E-cadherin、α-SMA mRNA표체수평균현저저우백단백유도조(균P＜0.01).상관성분석결과현시,ILK mRNA표체여TGF-β1、α-SMA화FN mRNA표체균정정상관(r=0.944、0.974화0.989,균P＜0.01).결론백단백가이유도HK-2세포발생전분화,ILK재기중발휘촉진작용.
