南昌大学学报(医学版)
南昌大學學報(醫學版)
남창대학학보(의학판)
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE JIANGXI
2013年
12期
1-6
,共6页
邹惟莹%杜毓菁%凌萍%朱盛华%杨蓓%张大雷%吴磊%邹挺
鄒惟瑩%杜毓菁%凌萍%硃盛華%楊蓓%張大雷%吳磊%鄒挺
추유형%두육정%릉평%주성화%양배%장대뢰%오뢰%추정
骨髓基质细胞%剥夺钙%剥夺血清%生存%细胞增殖
骨髓基質細胞%剝奪鈣%剝奪血清%生存%細胞增殖
골수기질세포%박탈개%박탈혈청%생존%세포증식
目的 探讨剥夺钙和血清对培养的骨髓基质细胞(BMSCs)的影响.方法 将传至第2代的BMSCs用DMEM培养液和无钙DMEM培养液按不同比例配制成细胞悬液,细胞浓度为2×104 mL-1,再根据是否加10%FBS分为6组:无10%FBS正常钙组(1组)、10%FBS正常钙组(2组,正常对照组)、10%FBS1/3正常钙组(3组)、10%FBS1/6正常钙组(4组)、10%FBS无钙组(5组)和无10%FBS无钙组(6组).培养后4 h,1~7 d用CCK-8试剂盒检测BMSCs细胞增殖数.无10%FBS无钙组、无10%FBS正常钙组、10%FBS无钙组和10%FBS正常钙组在培养后0、4、12、24和48 h,0、1、3、5和7 d 时在倒置相差显微镜下观察贴壁生长BMSCs细胞形态的变化.结果 1组、6组培养后4 h,1~7 d 时细胞增殖数均明显低于2组(均P<0.01),3组培养后4 h,3~5 d时细胞增殖数明显低于2组(P<0.05或P<0.01);4组培养后4 h,1、3和5 d时细胞增殖数均显著低于2组(均P<0.01),培养后7 d时细胞增殖数显著高于2组(P<0.01);5组培养后4 h,1~3、5 d时细胞增殖数均显著低于2组(均P<0.01).10%FBS无钙组、10%FBS正常钙组细胞形态正常,继续贴壁生长、增殖,细胞密度增加;无10%FBS无钙组、无10%FBS正常钙组细胞培养后4 h时开始贴壁细胞变小,培养后1、3 d时大量细胞漂浮、死亡,仅有极少数细胞保持贴壁.结论剥夺钙和血清均对细胞生存不利,低钙浓度对于BMSCs有短期抑制生存作用,但BMSCs能适应低钙环境,恢复活力和增殖.BMSCs适应低钙的意义与机制有待进一步探讨.
目的 探討剝奪鈣和血清對培養的骨髓基質細胞(BMSCs)的影響.方法 將傳至第2代的BMSCs用DMEM培養液和無鈣DMEM培養液按不同比例配製成細胞懸液,細胞濃度為2×104 mL-1,再根據是否加10%FBS分為6組:無10%FBS正常鈣組(1組)、10%FBS正常鈣組(2組,正常對照組)、10%FBS1/3正常鈣組(3組)、10%FBS1/6正常鈣組(4組)、10%FBS無鈣組(5組)和無10%FBS無鈣組(6組).培養後4 h,1~7 d用CCK-8試劑盒檢測BMSCs細胞增殖數.無10%FBS無鈣組、無10%FBS正常鈣組、10%FBS無鈣組和10%FBS正常鈣組在培養後0、4、12、24和48 h,0、1、3、5和7 d 時在倒置相差顯微鏡下觀察貼壁生長BMSCs細胞形態的變化.結果 1組、6組培養後4 h,1~7 d 時細胞增殖數均明顯低于2組(均P<0.01),3組培養後4 h,3~5 d時細胞增殖數明顯低于2組(P<0.05或P<0.01);4組培養後4 h,1、3和5 d時細胞增殖數均顯著低于2組(均P<0.01),培養後7 d時細胞增殖數顯著高于2組(P<0.01);5組培養後4 h,1~3、5 d時細胞增殖數均顯著低于2組(均P<0.01).10%FBS無鈣組、10%FBS正常鈣組細胞形態正常,繼續貼壁生長、增殖,細胞密度增加;無10%FBS無鈣組、無10%FBS正常鈣組細胞培養後4 h時開始貼壁細胞變小,培養後1、3 d時大量細胞漂浮、死亡,僅有極少數細胞保持貼壁.結論剝奪鈣和血清均對細胞生存不利,低鈣濃度對于BMSCs有短期抑製生存作用,但BMSCs能適應低鈣環境,恢複活力和增殖.BMSCs適應低鈣的意義與機製有待進一步探討.
목적 탐토박탈개화혈청대배양적골수기질세포(BMSCs)적영향.방법 장전지제2대적BMSCs용DMEM배양액화무개DMEM배양액안불동비례배제성세포현액,세포농도위2×104 mL-1,재근거시부가10%FBS분위6조:무10%FBS정상개조(1조)、10%FBS정상개조(2조,정상대조조)、10%FBS1/3정상개조(3조)、10%FBS1/6정상개조(4조)、10%FBS무개조(5조)화무10%FBS무개조(6조).배양후4 h,1~7 d용CCK-8시제합검측BMSCs세포증식수.무10%FBS무개조、무10%FBS정상개조、10%FBS무개조화10%FBS정상개조재배양후0、4、12、24화48 h,0、1、3、5화7 d 시재도치상차현미경하관찰첩벽생장BMSCs세포형태적변화.결과 1조、6조배양후4 h,1~7 d 시세포증식수균명현저우2조(균P<0.01),3조배양후4 h,3~5 d시세포증식수명현저우2조(P<0.05혹P<0.01);4조배양후4 h,1、3화5 d시세포증식수균현저저우2조(균P<0.01),배양후7 d시세포증식수현저고우2조(P<0.01);5조배양후4 h,1~3、5 d시세포증식수균현저저우2조(균P<0.01).10%FBS무개조、10%FBS정상개조세포형태정상,계속첩벽생장、증식,세포밀도증가;무10%FBS무개조、무10%FBS정상개조세포배양후4 h시개시첩벽세포변소,배양후1、3 d시대량세포표부、사망,부유겁소수세포보지첩벽.결론박탈개화혈청균대세포생존불리,저개농도대우BMSCs유단기억제생존작용,단BMSCs능괄응저개배경,회복활력화증식.BMSCs괄응저개적의의여궤제유대진일보탐토.