山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2014年
3期
1-3
,共3页
于成涛%刘广伟%孙志俭%卢云
于成濤%劉廣偉%孫誌儉%盧雲
우성도%류엄위%손지검%로운
胆管癌%α7烟碱型受体%尼古丁%银环蛇毒素
膽管癌%α7煙堿型受體%尼古丁%銀環蛇毒素
담관암%α7연감형수체%니고정%은배사독소
cholangiocarcinoma%α7 nicotinic receptor%nicotine%bungarotoxin
目的 观察α7烟碱型受体兴奋剂尼古丁、拮抗剂银环蛇毒素(α-BTX)对胆管癌细胞侵袭能力的影响,并探讨机制.方法 取对数期胆管癌细胞,去血清培养12 h,取200μL浓度分别为0.5 ×105、1.0×105、1.5×105、2.0×105/mL的胆管癌细胞加入Transwell上室,下室加入10％血清的RPMI1640培养液600 μL,于12、24、36、48 h观察侵袭细胞数.结果随细胞浓度及作用时间的增加,侵袭细胞数逐渐增加,但当浓度超过1.5×105/mL,时间超过36 h后,侵袭细胞数增长缓慢,据此筛选出1.5×105/mL细胞浓度、作用时间36 h用于后续实验.①取1.0×105/mL的胆管癌细胞加入Transwell上室,分为实验1、2、3、4组,分别加入尼古丁0、1×10-2、1×10-3、1×10-4g/L,培养36 h后0.1％结晶紫染色并于倒置显微镜下计数侵袭细胞数.②取1.0×105/mL的胆管癌细胞加入Transwell上室,分为实验1、2、3、4组,分别加入尼古丁0、1×10-2、1×10-2、1×10-2 g/L,α-BTX分别为2、2、4、6μg/mL,培养36 h后0.1％结晶紫染色并于倒置显微镜下计数侵袭细胞数.结果 单纯尼古丁作用后穿过基质胶的细胞数增多,实验1、2、3、4组细胞侵袭数分别为(17.90±1.70)、(25.56±1.02)、(26.03±1.32)、(23.22±1.24)个,实验1组与后三组比较,P均＜0.05;尼古丁联合α-BTX共同作用后穿过基质胶的细胞数减少,实验1、2、3、4组细胞侵袭数分别为(16.89±1.27)、(18.16±0.89)、(18.20±1.46)、(18.15±2.01)个,实验1组与后三组比较,P均＜0.05.结论 尼古丁可明显增强胆管癌细胞的侵袭能力,α-BTX可明显抵消尼古丁所产生的促侵袭能力,其机制可能通过改变α7烟碱型受体活性而发挥作用.
目的 觀察α7煙堿型受體興奮劑尼古丁、拮抗劑銀環蛇毒素(α-BTX)對膽管癌細胞侵襲能力的影響,併探討機製.方法 取對數期膽管癌細胞,去血清培養12 h,取200μL濃度分彆為0.5 ×105、1.0×105、1.5×105、2.0×105/mL的膽管癌細胞加入Transwell上室,下室加入10％血清的RPMI1640培養液600 μL,于12、24、36、48 h觀察侵襲細胞數.結果隨細胞濃度及作用時間的增加,侵襲細胞數逐漸增加,但噹濃度超過1.5×105/mL,時間超過36 h後,侵襲細胞數增長緩慢,據此篩選齣1.5×105/mL細胞濃度、作用時間36 h用于後續實驗.①取1.0×105/mL的膽管癌細胞加入Transwell上室,分為實驗1、2、3、4組,分彆加入尼古丁0、1×10-2、1×10-3、1×10-4g/L,培養36 h後0.1％結晶紫染色併于倒置顯微鏡下計數侵襲細胞數.②取1.0×105/mL的膽管癌細胞加入Transwell上室,分為實驗1、2、3、4組,分彆加入尼古丁0、1×10-2、1×10-2、1×10-2 g/L,α-BTX分彆為2、2、4、6μg/mL,培養36 h後0.1％結晶紫染色併于倒置顯微鏡下計數侵襲細胞數.結果 單純尼古丁作用後穿過基質膠的細胞數增多,實驗1、2、3、4組細胞侵襲數分彆為(17.90±1.70)、(25.56±1.02)、(26.03±1.32)、(23.22±1.24)箇,實驗1組與後三組比較,P均＜0.05;尼古丁聯閤α-BTX共同作用後穿過基質膠的細胞數減少,實驗1、2、3、4組細胞侵襲數分彆為(16.89±1.27)、(18.16±0.89)、(18.20±1.46)、(18.15±2.01)箇,實驗1組與後三組比較,P均＜0.05.結論 尼古丁可明顯增彊膽管癌細胞的侵襲能力,α-BTX可明顯牴消尼古丁所產生的促侵襲能力,其機製可能通過改變α7煙堿型受體活性而髮揮作用.
목적 관찰α7연감형수체흥강제니고정、길항제은배사독소(α-BTX)대담관암세포침습능력적영향,병탐토궤제.방법 취대수기담관암세포,거혈청배양12 h,취200μL농도분별위0.5 ×105、1.0×105、1.5×105、2.0×105/mL적담관암세포가입Transwell상실,하실가입10％혈청적RPMI1640배양액600 μL,우12、24、36、48 h관찰침습세포수.결과수세포농도급작용시간적증가,침습세포수축점증가,단당농도초과1.5×105/mL,시간초과36 h후,침습세포수증장완만,거차사선출1.5×105/mL세포농도、작용시간36 h용우후속실험.①취1.0×105/mL적담관암세포가입Transwell상실,분위실험1、2、3、4조,분별가입니고정0、1×10-2、1×10-3、1×10-4g/L,배양36 h후0.1％결정자염색병우도치현미경하계수침습세포수.②취1.0×105/mL적담관암세포가입Transwell상실,분위실험1、2、3、4조,분별가입니고정0、1×10-2、1×10-2、1×10-2 g/L,α-BTX분별위2、2、4、6μg/mL,배양36 h후0.1％결정자염색병우도치현미경하계수침습세포수.결과 단순니고정작용후천과기질효적세포수증다,실험1、2、3、4조세포침습수분별위(17.90±1.70)、(25.56±1.02)、(26.03±1.32)、(23.22±1.24)개,실험1조여후삼조비교,P균＜0.05;니고정연합α-BTX공동작용후천과기질효적세포수감소,실험1、2、3、4조세포침습수분별위(16.89±1.27)、(18.16±0.89)、(18.20±1.46)、(18.15±2.01)개,실험1조여후삼조비교,P균＜0.05.결론 니고정가명현증강담관암세포적침습능력,α-BTX가명현저소니고정소산생적촉침습능력,기궤제가능통과개변α7연감형수체활성이발휘작용.
