食品科学
食品科學
식품과학
FOOD SCIENCE
2014年
7期
123-127
,共5页
张艳丽%聂春明%周利伟%张伟%张宇宏%杨晓红
張豔麗%聶春明%週利偉%張偉%張宇宏%楊曉紅
장염려%섭춘명%주리위%장위%장우굉%양효홍
凝乳酶%乳酸乳球菌%食品级%表达
凝乳酶%乳痠乳毬菌%食品級%錶達
응유매%유산유구균%식품급%표체
chymosin%Lactococcus lactis%food-grade strain%expression
将牛凝乳酶原基因连接pNZ 8149载体,并转化乳酸乳球菌NZ3900,经乳酸链球菌素Nisin诱导,测得重组菌株胞内凝乳酶活力达到0.7 SU/mL,培养基中检测不到凝乳酶活力,实现了牛凝乳酶原基因在乳酸链球菌Nisin诱导基因表达系统(nisin controlled gene expression system,NICE)中活性表达.在此基础上,将分泌信号肽SPusp45连接于pNZ8149,构建了分泌型表达载体pNZ8149s,并实现牛凝乳酶原基因在NICE系统中分泌表达.当使用1 ng/mLNisin诱导5h后,重组菌株胞内检测不到凝乳酶活力,培养基中凝乳酶活力为1.2 SU/mL,说明pNZ8149s能够促使凝乳酶原从乳酸乳球菌中分泌.该方法为重组牛凝乳酶在食品级菌株中重组表达提供了一种可行的方案.
將牛凝乳酶原基因連接pNZ 8149載體,併轉化乳痠乳毬菌NZ3900,經乳痠鏈毬菌素Nisin誘導,測得重組菌株胞內凝乳酶活力達到0.7 SU/mL,培養基中檢測不到凝乳酶活力,實現瞭牛凝乳酶原基因在乳痠鏈毬菌Nisin誘導基因錶達繫統(nisin controlled gene expression system,NICE)中活性錶達.在此基礎上,將分泌信號肽SPusp45連接于pNZ8149,構建瞭分泌型錶達載體pNZ8149s,併實現牛凝乳酶原基因在NICE繫統中分泌錶達.噹使用1 ng/mLNisin誘導5h後,重組菌株胞內檢測不到凝乳酶活力,培養基中凝乳酶活力為1.2 SU/mL,說明pNZ8149s能夠促使凝乳酶原從乳痠乳毬菌中分泌.該方法為重組牛凝乳酶在食品級菌株中重組錶達提供瞭一種可行的方案.
장우응유매원기인련접pNZ 8149재체,병전화유산유구균NZ3900,경유산련구균소Nisin유도,측득중조균주포내응유매활력체도0.7 SU/mL,배양기중검측불도응유매활력,실현료우응유매원기인재유산련구균Nisin유도기인표체계통(nisin controlled gene expression system,NICE)중활성표체.재차기출상,장분비신호태SPusp45련접우pNZ8149,구건료분비형표체재체pNZ8149s,병실현우응유매원기인재NICE계통중분비표체.당사용1 ng/mLNisin유도5h후,중조균주포내검측불도응유매활력,배양기중응유매활력위1.2 SU/mL,설명pNZ8149s능구촉사응유매원종유산유구균중분비.해방법위중조우응유매재식품급균주중중조표체제공료일충가행적방안.
