淡水渔业
淡水漁業
담수어업
FRESHWATER FISHERIES
2014年
1期
20-25,58
,共7页
李春涛%蒋自立%曾伯平%张其中
李春濤%蔣自立%曾伯平%張其中
리춘도%장자립%증백평%장기중
大鳍鳠( Mystus macropterus)%IgL2基因cDNA%克隆%实时荧光定量PCR%表达
大鰭鳠( Mystus macropterus)%IgL2基因cDNA%剋隆%實時熒光定量PCR%錶達
대기화( Mystus macropterus)%IgL2기인cDNA%극륭%실시형광정량PCR%표체
My stus macropterus%IgL2 gene cDNA%clone%real-time PCR%expression
应用RT和RACE-PCR方法获得大鳍鳠（Mystus macrpoterus Bleeker）免疫球蛋白轻链（IgL）2型基因cDNA序列，分析了该基因在组织中的表达。该基因cDNA全长为929 bp，包含5＇非编码区43 bp，3＇非编码区159 bp，开放阅读框720 bp，编码239个氨基酸。编码的氨基酸序列分为可变区（ VL）和恒定区（ CL）。系统进化树分析显示，大鳍鳠IgL蛋白质序列与斑点叉尾 IgL 2型（ G型）合为一支，与其它硬骨鱼类IgL2型聚为一簇。组织分布研究表明，大鳍鳠IgL2基因表达量在脾脏最高，其次是鳃和头肾，这明显与大鳍鳠IgL3型基因表达方式不同。注射嗜水气单胞菌后，大鳍鳠IgL2基因转录表达量在脾脏、鳃和头肾都随时间发生变化。 IgL2基因转录表达量在脾脏4 d就到达高峰，在鳃1 d就达到峰值。这些应答规律与IgL3基因差异显著，推测， IgL2的表达主要参与鳃、肠和皮肤主导的粘膜免疫。
應用RT和RACE-PCR方法穫得大鰭鳠（Mystus macrpoterus Bleeker）免疫毬蛋白輕鏈（IgL）2型基因cDNA序列，分析瞭該基因在組織中的錶達。該基因cDNA全長為929 bp，包含5＇非編碼區43 bp，3＇非編碼區159 bp，開放閱讀框720 bp，編碼239箇氨基痠。編碼的氨基痠序列分為可變區（ VL）和恆定區（ CL）。繫統進化樹分析顯示，大鰭鳠IgL蛋白質序列與斑點扠尾 IgL 2型（ G型）閤為一支，與其它硬骨魚類IgL2型聚為一簇。組織分佈研究錶明，大鰭鳠IgL2基因錶達量在脾髒最高，其次是鰓和頭腎，這明顯與大鰭鳠IgL3型基因錶達方式不同。註射嗜水氣單胞菌後，大鰭鳠IgL2基因轉錄錶達量在脾髒、鰓和頭腎都隨時間髮生變化。 IgL2基因轉錄錶達量在脾髒4 d就到達高峰，在鰓1 d就達到峰值。這些應答規律與IgL3基因差異顯著，推測， IgL2的錶達主要參與鰓、腸和皮膚主導的粘膜免疫。
응용RT화RACE-PCR방법획득대기화（Mystus macrpoterus Bleeker）면역구단백경련（IgL）2형기인cDNA서렬，분석료해기인재조직중적표체。해기인cDNA전장위929 bp，포함5＇비편마구43 bp，3＇비편마구159 bp，개방열독광720 bp，편마239개안기산。편마적안기산서렬분위가변구（ VL）화항정구（ CL）。계통진화수분석현시，대기화IgL단백질서렬여반점차미 IgL 2형（ G형）합위일지，여기타경골어류IgL2형취위일족。조직분포연구표명，대기화IgL2기인표체량재비장최고，기차시새화두신，저명현여대기화IgL3형기인표체방식불동。주사기수기단포균후，대기화IgL2기인전록표체량재비장、새화두신도수시간발생변화。 IgL2기인전록표체량재비장4 d취도체고봉，재새1 d취체도봉치。저사응답규률여IgL3기인차이현저，추측， IgL2적표체주요삼여새、장화피부주도적점막면역。
RT-PCR and Rapid Amplification of cDNA Ends ( RACE) PCR was used to amplify cDNA of immunoglobulin light chain 2 isotype (IgL2) gene from catfish.IgL2 in Myts us macropterus had 929 nucleotides, including 5′-UTR of 43 nucleotides, 3′-UTR of 159 nucleotides and an open reading frame with 720 nucleotides encoding a peptide of 239 amino acids.The deduced amino acid sequence consisted of an constant region ( CL) and a variable domain ( VL).Phylogenetic tree based on some fish IgL amino acids showed that IgL 2 in M.macropterus was clustered closely with that ( G ) of I.Punctatus.The study on tissue distribution showed that IgL 2 mRNA expression of M.macropterus was mainly detected in spleen,gill and head kidney and increased significantly in these tissues after injection of Aeromonas hydrophila.IgL2 tran-scription level peaked on the4 th day in spleen and on the ist day in gill after bacterin immunization , which was different from that of IgL3 in M.macropterus.The result indicated that IgL2 played a critical role in immunity interaction of mucosa-associated lymphoid tissue ( MALT) in M.macropterus.
