东北林业大学学报
東北林業大學學報
동북임업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST FORESTRY UNIVERSITY
2014年
2期
120-123,132
,共5页
柽柳%酵母单杂交%W-box%ERF基因%WRKY基因
檉柳%酵母單雜交%W-box%ERF基因%WRKY基因
정류%효모단잡교%W-box%ERF기인%WRKY기인
Tamarix hispida%Yeast one-hybrid assay%W-box%Ethylene response factor ( ERF)%WRKY
乙烯响应因子（ ethylene response factor，ERF）参与植物逆境胁迫的应答，是在植物抗逆过程中起重要作用的一类转录因子。试验克隆了柽柳的一条ERF基因（ThERF1）的其启动子序列，其启动子中有3个W-box元件，试验通过酵母单杂交技术筛选获得了与W-box元件互作的基因ThWRKY2和ThWRKY8；进一步将ThERF1启动子中含有W-box元件、缺失W-box元件及突变W-box元件的片段构建到酵母报告载体pHIS2中，研究它们与ThWRKY2和ThWRKY8的结合能力。酵母单杂交结果表明，ThWRKY2和ThWRKY8能够与含有W-box元件的启动子片段互作，但不能与缺失及突变W-box元件的启动子片段互作。以上研究结果表明，ThWRKY2和ThWRKY8为ThERF 1上游的调控基因，能够通过结合ThERF1启动子中的W-box元件来调控ThERF1基因的表达。
乙烯響應因子（ ethylene response factor，ERF）參與植物逆境脅迫的應答，是在植物抗逆過程中起重要作用的一類轉錄因子。試驗剋隆瞭檉柳的一條ERF基因（ThERF1）的其啟動子序列，其啟動子中有3箇W-box元件，試驗通過酵母單雜交技術篩選穫得瞭與W-box元件互作的基因ThWRKY2和ThWRKY8；進一步將ThERF1啟動子中含有W-box元件、缺失W-box元件及突變W-box元件的片段構建到酵母報告載體pHIS2中，研究它們與ThWRKY2和ThWRKY8的結閤能力。酵母單雜交結果錶明，ThWRKY2和ThWRKY8能夠與含有W-box元件的啟動子片段互作，但不能與缺失及突變W-box元件的啟動子片段互作。以上研究結果錶明，ThWRKY2和ThWRKY8為ThERF 1上遊的調控基因，能夠通過結閤ThERF1啟動子中的W-box元件來調控ThERF1基因的錶達。
을희향응인자（ ethylene response factor，ERF）삼여식물역경협박적응답，시재식물항역과정중기중요작용적일류전록인자。시험극륭료정류적일조ERF기인（ThERF1）적기계동자서렬，기계동자중유3개W-box원건，시험통과효모단잡교기술사선획득료여W-box원건호작적기인ThWRKY2화ThWRKY8；진일보장ThERF1계동자중함유W-box원건、결실W-box원건급돌변W-box원건적편단구건도효모보고재체pHIS2중，연구타문여ThWRKY2화ThWRKY8적결합능력。효모단잡교결과표명，ThWRKY2화ThWRKY8능구여함유W-box원건적계동자편단호작，단불능여결실급돌변W-box원건적계동자편단호작。이상연구결과표명，ThWRKY2화ThWRKY8위ThERF 1상유적조공기인，능구통과결합ThERF1계동자중적W-box원건래조공ThERF1기인적표체。
Ethylene response factor ( ERF ) is involved in the response to adverse environments in plants and plays important roles in stress tolerance.We cloned the promoter of an ERF gene (ThERF1) with three W-box motifs from Tamarix hispi-da.We obtained two WRKY proteins, ThWRKY2 and ThWRKY8, bind to W-box motif specifically by yeast one-hybrid as-say.ThERF1 promoter fragments without W-box motifs or with W-box and the mutated W-box motifs were cloned into pHIS2 reporter vector to analyze their bindings to ThWRKY2 and ThWRKY8 by yeast one-hybrid.ThWRKY2 and ThWRKY8 can bind to the promoter fragment with W-box motifs, but fail in binding to the promoter fragment with the mutated W-box motifs or without W-box motifs.Therefore, ThWRKY2 and ThWRKY8 are the up-stream regulators of ThERF1, and can regulate the expression of ThERF1 by binding to the W-box motifs in its promoter .
