广西畜牧兽医
廣西畜牧獸醫
엄서축목수의
GUANGXI JOURNAL OF ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2013年
1期
11-15
,共5页
聂培%易驰喆%贺婷%陈亚明%刘平%侯小露%杜玉兰%何宝祥
聶培%易馳喆%賀婷%陳亞明%劉平%侯小露%杜玉蘭%何寶祥
섭배%역치철%하정%진아명%류평%후소로%두옥란%하보상
二重PCR%金黄色葡萄球菌%大肠杆菌
二重PCR%金黃色葡萄毬菌%大腸桿菌
이중PCR%금황색포도구균%대장간균
金黄色葡萄球菌和大肠杆菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌.选取金黄色葡萄球菌的Nuc基因和大肠杆菌16S-23SrRNA基因作为扩增靶基因序列,设计两对特异性引物.通过正交试验优化反应条件建立二重PCR检测体系,优化结果表明二重PCR扩增出两条特异性条带,大小与实验设计的249bp(金黄色葡萄球菌)和375bp(大肠杆菌)相符,而对其它奶牛乳房炎主要病原菌的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该二重PCR技术能同时检出14.6pg的金黄色葡萄球菌模板和26.0pg的大肠杆菌模板.使用该二重PCR检测29份临床奶样,发现其中17份携带相关基因,并分离得到相关致病菌.
金黃色葡萄毬菌和大腸桿菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌.選取金黃色葡萄毬菌的Nuc基因和大腸桿菌16S-23SrRNA基因作為擴增靶基因序列,設計兩對特異性引物.通過正交試驗優化反應條件建立二重PCR檢測體繫,優化結果錶明二重PCR擴增齣兩條特異性條帶,大小與實驗設計的249bp(金黃色葡萄毬菌)和375bp(大腸桿菌)相符,而對其它奶牛乳房炎主要病原菌的PCR擴增結果均為陰性;敏感性測定結果錶明,該二重PCR技術能同時檢齣14.6pg的金黃色葡萄毬菌模闆和26.0pg的大腸桿菌模闆.使用該二重PCR檢測29份臨床奶樣,髮現其中17份攜帶相關基因,併分離得到相關緻病菌.
금황색포도구균화대장간균시인기내우유방염적주요병원균.선취금황색포도구균적Nuc기인화대장간균16S-23SrRNA기인작위확증파기인서렬,설계량대특이성인물.통과정교시험우화반응조건건립이중PCR검측체계,우화결과표명이중PCR확증출량조특이성조대,대소여실험설계적249bp(금황색포도구균)화375bp(대장간균)상부,이대기타내우유방염주요병원균적PCR확증결과균위음성;민감성측정결과표명,해이중PCR기술능동시검출14.6pg적금황색포도구균모판화26.0pg적대장간균모판.사용해이중PCR검측29빈림상내양,발현기중17빈휴대상관기인,병분리득도상관치병균.
