分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2014年
3期
320-325
,共6页
付立伟%陈欢%杨进%侯宏卫%胡清源
付立偉%陳歡%楊進%侯宏衛%鬍清源
부립위%진환%양진%후굉위%호청원
磷酸化组蛋白H2AX%酶联免疫方法%基因毒性
燐痠化組蛋白H2AX%酶聯免疫方法%基因毒性
린산화조단백H2AX%매련면역방법%기인독성
Phospho-histone H2AX%Enzyme-linked immunesorbent assay%Genotoxicity
基于酶联免疫原理,建立了定量测定细胞中磷酸化组蛋白H2AX (γH2AX)含量的新方法,并用于评价卷烟烟气的基因毒性.采用不同剂量的烟气气相物与烟气粒相物暴露于中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞),通过测定不同染毒时间下细胞中γH2AX含量水平变化,考察烟气染毒与细胞DNA损伤的剂量效应关系,以及不同烟气组分基因毒性的差异.此外,通过定量监测细胞中活性氧的变化,探讨卷烟烟气暴露诱发细胞DNA双链断裂损伤的作用机理.结果表明,随烟气暴露时间的增加,细胞中γH2AX的含量在几小时内达到峰值,然后逐渐下降;染毒浓度越高,细胞中γH2AX含量达到峰值的时间越长;随着烟气粒相物或气相物染毒浓度的增高,细胞中γH2AX含量水平呈上升趋势;烟气粒相物染毒相比烟气气相物对细胞中γH2AX含量的影响更为显著;此外,烟气成分直接染毒会引起细胞内活性氧的含量增加.细胞内活性氧的含量变化与细胞DNA双链断裂标志物γH2AX的含量变化有较强相关性,卷烟烟气中自由基成分可能是诱发细胞DNA双链断裂的原因之一.
基于酶聯免疫原理,建立瞭定量測定細胞中燐痠化組蛋白H2AX (γH2AX)含量的新方法,併用于評價捲煙煙氣的基因毒性.採用不同劑量的煙氣氣相物與煙氣粒相物暴露于中國倉鼠卵巢細胞(CHO細胞),通過測定不同染毒時間下細胞中γH2AX含量水平變化,攷察煙氣染毒與細胞DNA損傷的劑量效應關繫,以及不同煙氣組分基因毒性的差異.此外,通過定量鑑測細胞中活性氧的變化,探討捲煙煙氣暴露誘髮細胞DNA雙鏈斷裂損傷的作用機理.結果錶明,隨煙氣暴露時間的增加,細胞中γH2AX的含量在幾小時內達到峰值,然後逐漸下降;染毒濃度越高,細胞中γH2AX含量達到峰值的時間越長;隨著煙氣粒相物或氣相物染毒濃度的增高,細胞中γH2AX含量水平呈上升趨勢;煙氣粒相物染毒相比煙氣氣相物對細胞中γH2AX含量的影響更為顯著;此外,煙氣成分直接染毒會引起細胞內活性氧的含量增加.細胞內活性氧的含量變化與細胞DNA雙鏈斷裂標誌物γH2AX的含量變化有較彊相關性,捲煙煙氣中自由基成分可能是誘髮細胞DNA雙鏈斷裂的原因之一.
기우매련면역원리,건립료정량측정세포중린산화조단백H2AX (γH2AX)함량적신방법,병용우평개권연연기적기인독성.채용불동제량적연기기상물여연기립상물폭로우중국창서란소세포(CHO세포),통과측정불동염독시간하세포중γH2AX함량수평변화,고찰연기염독여세포DNA손상적제량효응관계,이급불동연기조분기인독성적차이.차외,통과정량감측세포중활성양적변화,탐토권연연기폭로유발세포DNA쌍련단렬손상적작용궤리.결과표명,수연기폭로시간적증가,세포중γH2AX적함량재궤소시내체도봉치,연후축점하강;염독농도월고,세포중γH2AX함량체도봉치적시간월장;수착연기립상물혹기상물염독농도적증고,세포중γH2AX함량수평정상승추세;연기립상물염독상비연기기상물대세포중γH2AX함량적영향경위현저;차외,연기성분직접염독회인기세포내활성양적함량증가.세포내활성양적함량변화여세포DNA쌍련단렬표지물γH2AX적함량변화유교강상관성,권연연기중자유기성분가능시유발세포DNA쌍련단렬적원인지일.
