CAJ | 학술논문

目的:探讨经典瞬时受体电位通道6(TRPC6)对血小板源性生长因子(PDGF)诱导的气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖的影响.方法:组织贴块联合酶消化法培养原代大鼠ASMCs.间接免疫荧光法鉴定平滑肌细胞及检测TRPC6在ASMCs上的表达.CCK-8法检测PDGF诱导ASMCs的增殖.Real-time PCR 检测PDGF作用后TRPC6 mRNA的表达.Western blotting检测PDGF作用后TRPC6蛋白的表达.CCK-8法检测TRPC6阻断剂对PDGF 诱导ASMCs增殖的作用.结果:细胞免疫荧光显示:TRPC6广泛存在于气道平滑肌细胞.CCK-8法检测细胞的增殖发现,20 μg/L PDGF作用后 ASMCs发生增殖(P<0.05);PDGF与TRPC6阻断剂SKF96365共同作用于ASMCs,ASMCs的增殖较单独使用PDGF组减弱(P<0.05),且减弱的程度具有剂量及时间依赖性.Real-time PCR结果显示:PDGF分别作用于ASMCs 12 h、24 h和48 h后,TRPC6 mRNA表达与相应的对照组比较明显升高(P<0.05).Western blotting检测结果显示:PDGF分别作用ASMCs 24 h和48 h后,TRPC6蛋白表达与相应的对照组比较明显升高(P<0.05).结论:TRPC6参与了PDGF诱导ASMCs增殖的过程,PDGF促进ASMCs增殖可能与其上调TRPC6 mRNA和蛋白表达相关.
목적:탐토경전순시수체전위통도6(TRPC6)대혈소판원성생장인자(PDGF)유도적기도평활기세포(ASMCs)증식적영향.방법:조직첩괴연합매소화법배양원대대서ASMCs.간접면역형광법감정평활기세포급검측TRPC6재ASMCs상적표체.CCK-8법검측PDGF유도ASMCs적증식.Real-time PCR 검측PDGF작용후TRPC6 mRNA적표체.Western blotting검측PDGF작용후TRPC6단백적표체.CCK-8법검측TRPC6조단제대PDGF 유도ASMCs증식적작용.결과:세포면역형광현시:TRPC6엄범존재우기도평활기세포.CCK-8법검측세포적증식발현,20 μg/L PDGF작용후 ASMCs발생증식(P<0.05);PDGF여TRPC6조단제SKF96365공동작용우ASMCs,ASMCs적증식교단독사용PDGF조감약(P<0.05),차감약적정도구유제량급시간의뢰성.Real-time PCR결과현시:PDGF분별작용우ASMCs 12 h、24 h화48 h후,TRPC6 mRNA표체여상응적대조조비교명현승고(P<0.05).Western blotting검측결과현시:PDGF분별작용ASMCs 24 h화48 h후,TRPC6단백표체여상응적대조조비교명현승고(P<0.05).결론:TRPC6삼여료PDGF유도ASMCs증식적과정,PDGF촉진ASMCs증식가능여기상조TRPC6 mRNA화단백표체상관.