中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
12期
2179-2185
,共7页
马泳泳%黄进%周淑娟%葛杭萍%俞康
馬泳泳%黃進%週淑娟%葛杭萍%俞康
마영영%황진%주숙연%갈항평%유강
含IQ模序的GTP酶活化蛋白1%多发性骨髓瘤%MAP激酶信号通路%细胞增殖%细胞外信号调节激酶
含IQ模序的GTP酶活化蛋白1%多髮性骨髓瘤%MAP激酶信號通路%細胞增殖%細胞外信號調節激酶
함IQ모서적GTP매활화단백1%다발성골수류%MAP격매신호통로%세포증식%세포외신호조절격매
目的:探讨含IQ模序的GTP酶活化蛋白1(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)在骨髓瘤细胞中的过表达及其机制.方法:RT-PCR和Western blotting 检测RPMI8226和U266细胞IQGAP1表达;使用不同的寡核苷酸序列构建沉默人IQGAP1的shRNA质粒(clone 1、clone 2、clone 3和clone 4)、转染RPMI8226细胞,RT-PCR和Western blotting检测其IQGAP1表达;Western blotting检测RPMI8226-shIQGAP1组(clone 1)、RPMI8226-shRNA阴性对照组和RPMI8226未转染组细胞p-ERK1/2、ERK1/2、Akt、p-AKT、STAT3和p-STAT3水平,免疫共沉淀确定IQGAP1和ERK的关系.结果:IQGAP1在RPMI8226和U266骨髓瘤细胞株中过表达,使用shRNA表达质粒沉默RPMI8226细胞IQGAP1 后,IQGAP1表达减少,在有或无血管内皮生长因子(VEGF)/白细胞介素6(IL-6)作用下检测RPMI8226-shIQGAP1组(clone 1)细胞增殖明显下降.进一步检测3组细胞p-ERK1/2、ERK1/2、AKT、p-AKT、STAT3和p-STAT3蛋白水平,与RPMI8226-shRNA阴性对照组和RPMI8226未转染组相比,RPMI8226-shIQGAP1组ERK1/2磷酸化水平下降70.2%,免疫共沉淀法明确在RPMI8226细胞中IQGAP1和ERK存在相互作用.结论:IQGAP1在骨髓瘤细胞中的过表达可能与MAPK途径的ERK相互作用有关.
目的:探討含IQ模序的GTP酶活化蛋白1(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)在骨髓瘤細胞中的過錶達及其機製.方法:RT-PCR和Western blotting 檢測RPMI8226和U266細胞IQGAP1錶達;使用不同的寡覈苷痠序列構建沉默人IQGAP1的shRNA質粒(clone 1、clone 2、clone 3和clone 4)、轉染RPMI8226細胞,RT-PCR和Western blotting檢測其IQGAP1錶達;Western blotting檢測RPMI8226-shIQGAP1組(clone 1)、RPMI8226-shRNA陰性對照組和RPMI8226未轉染組細胞p-ERK1/2、ERK1/2、Akt、p-AKT、STAT3和p-STAT3水平,免疫共沉澱確定IQGAP1和ERK的關繫.結果:IQGAP1在RPMI8226和U266骨髓瘤細胞株中過錶達,使用shRNA錶達質粒沉默RPMI8226細胞IQGAP1 後,IQGAP1錶達減少,在有或無血管內皮生長因子(VEGF)/白細胞介素6(IL-6)作用下檢測RPMI8226-shIQGAP1組(clone 1)細胞增殖明顯下降.進一步檢測3組細胞p-ERK1/2、ERK1/2、AKT、p-AKT、STAT3和p-STAT3蛋白水平,與RPMI8226-shRNA陰性對照組和RPMI8226未轉染組相比,RPMI8226-shIQGAP1組ERK1/2燐痠化水平下降70.2%,免疫共沉澱法明確在RPMI8226細胞中IQGAP1和ERK存在相互作用.結論:IQGAP1在骨髓瘤細胞中的過錶達可能與MAPK途徑的ERK相互作用有關.
목적:탐토함IQ모서적GTP매활화단백1(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)재골수류세포중적과표체급기궤제.방법:RT-PCR화Western blotting 검측RPMI8226화U266세포IQGAP1표체;사용불동적과핵감산서렬구건침묵인IQGAP1적shRNA질립(clone 1、clone 2、clone 3화clone 4)、전염RPMI8226세포,RT-PCR화Western blotting검측기IQGAP1표체;Western blotting검측RPMI8226-shIQGAP1조(clone 1)、RPMI8226-shRNA음성대조조화RPMI8226미전염조세포p-ERK1/2、ERK1/2、Akt、p-AKT、STAT3화p-STAT3수평,면역공침정학정IQGAP1화ERK적관계.결과:IQGAP1재RPMI8226화U266골수류세포주중과표체,사용shRNA표체질립침묵RPMI8226세포IQGAP1 후,IQGAP1표체감소,재유혹무혈관내피생장인자(VEGF)/백세포개소6(IL-6)작용하검측RPMI8226-shIQGAP1조(clone 1)세포증식명현하강.진일보검측3조세포p-ERK1/2、ERK1/2、AKT、p-AKT、STAT3화p-STAT3단백수평,여RPMI8226-shRNA음성대조조화RPMI8226미전염조상비,RPMI8226-shIQGAP1조ERK1/2린산화수평하강70.2%,면역공침정법명학재RPMI8226세포중IQGAP1화ERK존재상호작용.결론:IQGAP1재골수류세포중적과표체가능여MAPK도경적ERK상호작용유관.
