中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
12期
2144-2151
,共8页
王全胜%尹红霞%张阿丽%陈建武%卢芙蓉%薛卡明%谢纪文%刘建国%李仁康%邓安国
王全勝%尹紅霞%張阿麗%陳建武%盧芙蓉%薛卡明%謝紀文%劉建國%李仁康%鄧安國
왕전성%윤홍하%장아려%진건무%로부용%설잡명%사기문%류건국%리인강%산안국
保护素D1%糖尿病肾病%纤维化%炎症%足突细胞%上皮-间充质转化
保護素D1%糖尿病腎病%纖維化%炎癥%足突細胞%上皮-間充質轉化
보호소D1%당뇨병신병%섬유화%염증%족돌세포%상피-간충질전화
目的:保护素D1(PD1)是一个潜在的抗炎症脂蛋白分子,本实验探讨其治疗早期糖尿病肾病(DN)肾纤维化的作用及机制.方法:用链脲佐菌素125 mg/kg 2次腹腔注射C57BL/6J雌性小鼠,建立早期DN小鼠模型.糖尿病模型成功后,用PD1(0.08 mg·kg-1·d-1)腹腔注射治疗,设正常鼠及DN鼠为对照.治疗8周后检测各组小鼠24 h尿蛋白及尿白蛋白定量、体重、肾重、肾重/体重比、血清及尿肌酐和肌酐清除率;用PAS染色法检测肾小球系膜区基质/肾小球面积比,用免疫荧光染色法检测肾皮质中巨噬细胞的数量,用Western blotting检测肾小球纤连蛋白(FN)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,以及肾小球足突细胞特异性上皮标志蛋白zonula occludens-1(ZO-1)和P-cadherin的表达;同时,体外用高糖刺激小鼠巨噬细胞株RAW264.7,检测PD1对其分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的抑制作用.体外用转化生长因子β1(TGF-β1)刺激小鼠足突细胞株,用Western blotting检测PD1对其诱导足突细胞上皮-间充质转化(EMT)中上皮细胞标志蛋白P-cadherin 和ZO-1减少的恢复作用,及间充质细胞标志蛋白成纤维细胞特异性蛋白1(FSP1)和α-SMA过表达的抑制作用.结果:PD1能减少DN小鼠肾小球系膜基质的积聚、24 h尿蛋白及尿白蛋白定量、体重、肾重和肾重/体重比,抑制异常增高的肌酐清除率.PD1能减少DN小鼠肾皮质中巨噬细胞的数量,抑制DN小鼠肾小球FN和α-SMA的表达,恢复足突细胞特异性上皮标志蛋白ZO-1和P-cadherin的表达.PD1能抑制高糖诱导RAW264.7分泌TNF-α和IL-1β,能抑制TGF-β1诱导足突细胞FSP1和α-SMA表达的增加以及ZO-1和P-cadherin表达的减少.结论:PD1能减轻早期DN小鼠肾纤维化,其部分机制可能通过抑制肾脏的炎症及足突细胞EMT.
目的:保護素D1(PD1)是一箇潛在的抗炎癥脂蛋白分子,本實驗探討其治療早期糖尿病腎病(DN)腎纖維化的作用及機製.方法:用鏈脲佐菌素125 mg/kg 2次腹腔註射C57BL/6J雌性小鼠,建立早期DN小鼠模型.糖尿病模型成功後,用PD1(0.08 mg·kg-1·d-1)腹腔註射治療,設正常鼠及DN鼠為對照.治療8週後檢測各組小鼠24 h尿蛋白及尿白蛋白定量、體重、腎重、腎重/體重比、血清及尿肌酐和肌酐清除率;用PAS染色法檢測腎小毬繫膜區基質/腎小毬麵積比,用免疫熒光染色法檢測腎皮質中巨噬細胞的數量,用Western blotting檢測腎小毬纖連蛋白(FN)和α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的錶達,以及腎小毬足突細胞特異性上皮標誌蛋白zonula occludens-1(ZO-1)和P-cadherin的錶達;同時,體外用高糖刺激小鼠巨噬細胞株RAW264.7,檢測PD1對其分泌腫瘤壞死因子α(TNF-α)和白細胞介素1β(IL-1β)的抑製作用.體外用轉化生長因子β1(TGF-β1)刺激小鼠足突細胞株,用Western blotting檢測PD1對其誘導足突細胞上皮-間充質轉化(EMT)中上皮細胞標誌蛋白P-cadherin 和ZO-1減少的恢複作用,及間充質細胞標誌蛋白成纖維細胞特異性蛋白1(FSP1)和α-SMA過錶達的抑製作用.結果:PD1能減少DN小鼠腎小毬繫膜基質的積聚、24 h尿蛋白及尿白蛋白定量、體重、腎重和腎重/體重比,抑製異常增高的肌酐清除率.PD1能減少DN小鼠腎皮質中巨噬細胞的數量,抑製DN小鼠腎小毬FN和α-SMA的錶達,恢複足突細胞特異性上皮標誌蛋白ZO-1和P-cadherin的錶達.PD1能抑製高糖誘導RAW264.7分泌TNF-α和IL-1β,能抑製TGF-β1誘導足突細胞FSP1和α-SMA錶達的增加以及ZO-1和P-cadherin錶達的減少.結論:PD1能減輕早期DN小鼠腎纖維化,其部分機製可能通過抑製腎髒的炎癥及足突細胞EMT.
목적:보호소D1(PD1)시일개잠재적항염증지단백분자,본실험탐토기치료조기당뇨병신병(DN)신섬유화적작용급궤제.방법:용련뇨좌균소125 mg/kg 2차복강주사C57BL/6J자성소서,건립조기DN소서모형.당뇨병모형성공후,용PD1(0.08 mg·kg-1·d-1)복강주사치료,설정상서급DN서위대조.치료8주후검측각조소서24 h뇨단백급뇨백단백정량、체중、신중、신중/체중비、혈청급뇨기항화기항청제솔;용PAS염색법검측신소구계막구기질/신소구면적비,용면역형광염색법검측신피질중거서세포적수량,용Western blotting검측신소구섬련단백(FN)화α-평활기기동단백(α-SMA)적표체,이급신소구족돌세포특이성상피표지단백zonula occludens-1(ZO-1)화P-cadherin적표체;동시,체외용고당자격소서거서세포주RAW264.7,검측PD1대기분비종류배사인자α(TNF-α)화백세포개소1β(IL-1β)적억제작용.체외용전화생장인자β1(TGF-β1)자격소서족돌세포주,용Western blotting검측PD1대기유도족돌세포상피-간충질전화(EMT)중상피세포표지단백P-cadherin 화ZO-1감소적회복작용,급간충질세포표지단백성섬유세포특이성단백1(FSP1)화α-SMA과표체적억제작용.결과:PD1능감소DN소서신소구계막기질적적취、24 h뇨단백급뇨백단백정량、체중、신중화신중/체중비,억제이상증고적기항청제솔.PD1능감소DN소서신피질중거서세포적수량,억제DN소서신소구FN화α-SMA적표체,회복족돌세포특이성상피표지단백ZO-1화P-cadherin적표체.PD1능억제고당유도RAW264.7분비TNF-α화IL-1β,능억제TGF-β1유도족돌세포FSP1화α-SMA표체적증가이급ZO-1화P-cadherin표체적감소.결론:PD1능감경조기DN소서신섬유화,기부분궤제가능통과억제신장적염증급족돌세포EMT.
