中西医结合肝病杂志
中西醫結閤肝病雜誌
중서의결합간병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE ON LIVER DISEASES
2014年
2期
106-108,后插3
,共4页
Kupffer细胞%细胞分离%细胞鉴定
Kupffer細胞%細胞分離%細胞鑒定
Kupffer세포%세포분리%세포감정
Kupffer cells%cell isolation%cell identification
目的:研究一种简便实用的大鼠Kupffer细胞(KCs)的分离与鉴定方法.方法:原位两步灌流法对大鼠肝脏进行冲洗消化;利用Percoll液进行不连续密度梯度离心分离KCs;;选择性贴壁纯化KCs;台盼蓝染色法鉴定细胞存活率;吞噬实验鉴定细胞功能;ED1单克隆抗体免疫荧光细胞化学鉴定KCs;显微镜下观察KCs形态变化.结果:获取的KCs数量为(2.41±0.32)×107/只,其中活细胞数量占(92.3±2.12)％;吞噬实验显示(95.2±2.58)％的细胞内存在碳素颗粒;免疫荧光化学检测证明KCs纯度为(96.3±1.46)％;在显微镜下观察KCs形态,36h细胞形态变得不规则,3d后呈星形或多角形,体外培养可以存活7～10d.结论:此种KCs分离方法操作相对简便,获取的细胞数量、活性功能、纯度等方面均能达到进一步的实验要求,值得推广.
目的:研究一種簡便實用的大鼠Kupffer細胞(KCs)的分離與鑒定方法.方法:原位兩步灌流法對大鼠肝髒進行遲洗消化;利用Percoll液進行不連續密度梯度離心分離KCs;;選擇性貼壁純化KCs;檯盼藍染色法鑒定細胞存活率;吞噬實驗鑒定細胞功能;ED1單剋隆抗體免疫熒光細胞化學鑒定KCs;顯微鏡下觀察KCs形態變化.結果:穫取的KCs數量為(2.41±0.32)×107/隻,其中活細胞數量佔(92.3±2.12)％;吞噬實驗顯示(95.2±2.58)％的細胞內存在碳素顆粒;免疫熒光化學檢測證明KCs純度為(96.3±1.46)％;在顯微鏡下觀察KCs形態,36h細胞形態變得不規則,3d後呈星形或多角形,體外培養可以存活7～10d.結論:此種KCs分離方法操作相對簡便,穫取的細胞數量、活性功能、純度等方麵均能達到進一步的實驗要求,值得推廣.
목적:연구일충간편실용적대서Kupffer세포(KCs)적분리여감정방법.방법:원위량보관류법대대서간장진행충세소화;이용Percoll액진행불련속밀도제도리심분리KCs;;선택성첩벽순화KCs;태반람염색법감정세포존활솔;탄서실험감정세포공능;ED1단극륭항체면역형광세포화학감정KCs;현미경하관찰KCs형태변화.결과:획취적KCs수량위(2.41±0.32)×107/지,기중활세포수량점(92.3±2.12)％;탄서실험현시(95.2±2.58)％적세포내존재탄소과립;면역형광화학검측증명KCs순도위(96.3±1.46)％;재현미경하관찰KCs형태,36h세포형태변득불규칙,3d후정성형혹다각형,체외배양가이존활7～10d.결론:차충KCs분리방법조작상대간편,획취적세포수량、활성공능、순도등방면균능체도진일보적실험요구,치득추엄.
