湖南师范大学学报（医学版）
湖南師範大學學報（醫學版）
호남사범대학학보（의학판）
JOURNAL OF HUNAN NORMAL UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2012年
3期
6-8,13
,共4页
杨双%袁仕善%潭云洪%邓志高%孙文霞%李民
楊雙%袁仕善%潭雲洪%鄧誌高%孫文霞%李民
양쌍%원사선%담운홍%산지고%손문하%리민
结核分枝杆菌%CFP10%克隆%表达
結覈分枝桿菌%CFP10%剋隆%錶達
결핵분지간균%CFP10%극륭%표체
目的:克隆和表达结核分枝杆菌CFP10,并分析其免疫学活性.方法:自结核分枝杆菌标准株H37Rv提取基因组DNA,PCR扩增cfp10基因,克隆至T载体pMD18T,转化入大肠杆菌JM109,菌落PCR鉴定阳性克隆并测序分析.将测序正确的pMD18-cfp10的cfp10基因亚克隆至表达载体PQE30,构建重组质粒PQE30-cfp10,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,PCR和双酶切鉴定阳性重组体,IPTG诱导CFP10表达,亲和层析纯化,western-blot分析其免疫活性.结果:成功构建PQE30-cfp 10重组表达质粒,表达、纯化获得分子量约10kDa的CFP10,并能被结核病人血清识别.结论:克隆表达获得具有免疫活性的重组结核分枝杆菌CFP10.
目的:剋隆和錶達結覈分枝桿菌CFP10,併分析其免疫學活性.方法:自結覈分枝桿菌標準株H37Rv提取基因組DNA,PCR擴增cfp10基因,剋隆至T載體pMD18T,轉化入大腸桿菌JM109,菌落PCR鑒定暘性剋隆併測序分析.將測序正確的pMD18-cfp10的cfp10基因亞剋隆至錶達載體PQE30,構建重組質粒PQE30-cfp10,轉化大腸桿菌JM109感受態細胞,PCR和雙酶切鑒定暘性重組體,IPTG誘導CFP10錶達,親和層析純化,western-blot分析其免疫活性.結果:成功構建PQE30-cfp 10重組錶達質粒,錶達、純化穫得分子量約10kDa的CFP10,併能被結覈病人血清識彆.結論:剋隆錶達穫得具有免疫活性的重組結覈分枝桿菌CFP10.
목적:극륭화표체결핵분지간균CFP10,병분석기면역학활성.방법:자결핵분지간균표준주H37Rv제취기인조DNA,PCR확증cfp10기인,극륭지T재체pMD18T,전화입대장간균JM109,균락PCR감정양성극륭병측서분석.장측서정학적pMD18-cfp10적cfp10기인아극륭지표체재체PQE30,구건중조질립PQE30-cfp10,전화대장간균JM109감수태세포,PCR화쌍매절감정양성중조체,IPTG유도CFP10표체,친화층석순화,western-blot분석기면역활성.결과:성공구건PQE30-cfp 10중조표체질립,표체、순화획득분자량약10kDa적CFP10,병능피결핵병인혈청식별.결론:극륭표체획득구유면역활성적중조결핵분지간균CFP10.
