贵州医药
貴州醫藥
귀주의약
GUIZHOU MEDICAL JOURNAL
2012年
7期
579-582
,共4页
郑丹%孙袁%刘菁%屈植风%周翠萍%楼迪栋
鄭丹%孫袁%劉菁%屈植風%週翠萍%樓迪棟
정단%손원%류정%굴식풍%주취평%루적동
尖锐湿疣%梅毒%融合蛋白%克隆%表达
尖銳濕疣%梅毒%融閤蛋白%剋隆%錶達
첨예습우%매독%융합단백%극륭%표체
目的 分别从梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)临床菌株和尖锐湿疣(cA)组织中扩增人乳头瘤病毒(HPV)6b型L1和TpN15基因,构建HPV6b L1-TpN15嵌合基因及其原核表达系统.方法 采用PCR分别从CA组织及Tp临床菌株中扩增HPV6b L1和TpN15基因片段,构建HPV6b L1-TpN15嵌合基因,将其克隆入原核表达载体pET32a(+)构建重组质粒pET32a(+)/HPV6b L1-TpN15,经测序鉴定后转化大肠杆菌BL21 (DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后表达的融合蛋白用十二烷基磺酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、蛋白质印迹法分析鉴定.结果 HPV6b L1-TpN15融合蛋白在原核表达系统中得到了较高表达.结论 原核表达的HPV6bL1-TpN15融合蛋白具较强的抗原性.
目的 分彆從梅毒螺鏇體(Treponema pallidum,Tp)臨床菌株和尖銳濕疣(cA)組織中擴增人乳頭瘤病毒(HPV)6b型L1和TpN15基因,構建HPV6b L1-TpN15嵌閤基因及其原覈錶達繫統.方法 採用PCR分彆從CA組織及Tp臨床菌株中擴增HPV6b L1和TpN15基因片段,構建HPV6b L1-TpN15嵌閤基因,將其剋隆入原覈錶達載體pET32a(+)構建重組質粒pET32a(+)/HPV6b L1-TpN15,經測序鑒定後轉化大腸桿菌BL21 (DE3),經異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導後錶達的融閤蛋白用十二烷基磺痠鈉(SDS)-聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)、蛋白質印跡法分析鑒定.結果 HPV6b L1-TpN15融閤蛋白在原覈錶達繫統中得到瞭較高錶達.結論 原覈錶達的HPV6bL1-TpN15融閤蛋白具較彊的抗原性.
목적 분별종매독라선체(Treponema pallidum,Tp)림상균주화첨예습우(cA)조직중확증인유두류병독(HPV)6b형L1화TpN15기인,구건HPV6b L1-TpN15감합기인급기원핵표체계통.방법 채용PCR분별종CA조직급Tp림상균주중확증HPV6b L1화TpN15기인편단,구건HPV6b L1-TpN15감합기인,장기극륭입원핵표체재체pET32a(+)구건중조질립pET32a(+)/HPV6b L1-TpN15,경측서감정후전화대장간균BL21 (DE3),경이병기류대-β-D-반유당감(IPTG)유도후표체적융합단백용십이완기광산납(SDS)-취병희선알응효전영(PAGE)、단백질인적법분석감정.결과 HPV6b L1-TpN15융합단백재원핵표체계통중득도료교고표체.결론 원핵표체적HPV6bL1-TpN15융합단백구교강적항원성.
