林业科学研究
林業科學研究
임업과학연구
FOREST RESEARCH
2013年
1期
76-80
,共5页
廖声熙%崔凯%张鹏%王海英%崔永忠%袁首乾
廖聲熙%崔凱%張鵬%王海英%崔永忠%袁首乾
료성희%최개%장붕%왕해영%최영충%원수건
构树%ISSR%PCR反应体系%正交试验优化
構樹%ISSR%PCR反應體繫%正交試驗優化
구수%ISSR%PCR반응체계%정교시험우화
利用正交试验对Taq酶浓度、引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度和模板DNA浓度5个因素进行优化,从而建立了一套适宜构树的ISSR-PCR反应体系.在20 μL的反应体系中,各反应物的最适宜含量为:0.07 U·μL-1 TaqDNA聚合酶、0.35 μmol·L-1ISSR引物、0.3 mmol·L-dNTPs,2.0 mmol·L-Mg2+、1.2 ng· μL-1模板DNA.PCR扩增程序为:94℃预变性5min,94℃变性30 s,46℃退火45 s,72℃延伸2 min,40个循环.
利用正交試驗對Taq酶濃度、引物濃度、dNTPs濃度、Mg2+濃度和模闆DNA濃度5箇因素進行優化,從而建立瞭一套適宜構樹的ISSR-PCR反應體繫.在20 μL的反應體繫中,各反應物的最適宜含量為:0.07 U·μL-1 TaqDNA聚閤酶、0.35 μmol·L-1ISSR引物、0.3 mmol·L-dNTPs,2.0 mmol·L-Mg2+、1.2 ng· μL-1模闆DNA.PCR擴增程序為:94℃預變性5min,94℃變性30 s,46℃退火45 s,72℃延伸2 min,40箇循環.
이용정교시험대Taq매농도、인물농도、dNTPs농도、Mg2+농도화모판DNA농도5개인소진행우화,종이건립료일투괄의구수적ISSR-PCR반응체계.재20 μL적반응체계중,각반응물적최괄의함량위:0.07 U·μL-1 TaqDNA취합매、0.35 μmol·L-1ISSR인물、0.3 mmol·L-dNTPs,2.0 mmol·L-Mg2+、1.2 ng· μL-1모판DNA.PCR확증정서위:94℃예변성5min,94℃변성30 s,46℃퇴화45 s,72℃연신2 min,40개순배.
