弓形虫表面抗原P22的重组体构建及临床应用研究
궁형충표면항원P22적중조체구건급림상응용연구
Establishment of the TOX Surface Antigen of P22 Protein Fragment Expressed in Prokaryotic Expression Vector
  • 万方数据
    中国产前诊断杂志（电子版） 중국산전진단잡지（전자판）
    CHINESE JOURNAL OF PRENATAL DIAGNOSIS(ELECTRONIC VERSION)
    2012年 1期 12-16 ,共5页

    吴丽霞%赵玉红%孙超%郭晶%陈咏君%张莉%杨丽荣%李新新

    오려하%조옥홍%손초%곽정%진영군%장리%양려영%리신신

    弓形虫%表面抗原P22%重组蛋白 弓形蟲%錶麵抗原P22%重組蛋白
    궁형충%표면항원P22%중조단백
    目的 克隆并构建pGEX-4T-1-P22重组表达载体,获取纯化的P22蛋白,为进一步研究P22的生物学特性和免疫保护作用奠定实验基础.方法 应用PCR技术扩增P22基因片段,连接到载体中,诱导并纯化P22蛋白,进行SDS-PAGE和Western blot鉴定,并组装成弓形虫IgM抗体酶联免疫(ELISA)试剂盒,并与进口试剂盒对比.结果 成功构建了重组质粒pGEX-4T-1-P22,并得到分子量在43KD的大量表达蛋白,具有良好的抗原性,将该蛋白组装成ELISA试剂盒检测IgM抗体,与意大利SORIN试剂盒对比检测450份临床血清,阴阳性符合率分别为92.16％和88.06％,总的符合率为88.89％.结论 高效表达纯化的P22重组蛋白抗原性强,利用其建立的IgM ELISA试剂盒与进口试剂盒对比,具有较高的灵敏度和特异性,可用于检测弓形虫抗体.
    목적 극륭병구건pGEX-4T-1-P22중조표체재체,획취순화적P22단백,위진일보연구P22적생물학특성화면역보호작용전정실험기출.방법 응용PCR기술확증P22기인편단,련접도재체중,유도병순화P22단백,진행SDS-PAGE화Western blot감정,병조장성궁형충IgM항체매련면역(ELISA)시제합,병여진구시제합대비.결과 성공구건료중조질립pGEX-4T-1-P22,병득도분자량재43KD적대량표체단백,구유량호적항원성,장해단백조장성ELISA시제합검측IgM항체,여의대리SORIN시제합대비검측450빈림상혈청,음양성부합솔분별위92.16％화88.06％,총적부합솔위88.89％.결론 고효표체순화적P22중조단백항원성강,이용기건립적IgM ELISA시제합여진구시제합대비,구유교고적령민도화특이성,가용우검측궁형충항체.
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