CAJ | 학술논문

目的:探讨过表达Tie2基因后单核细胞功能的变化及对内皮细胞增殖、迁移、小管形成的影响,初步研究TEMs(Tie2-expressing monocytes)促血管生成的机制.方法:建立过表达Tie2单核细胞系,荧光倒置显微镜下观察U937细胞的感染情况,RT-PCR、Western blot分别检测感染后U937细胞Tie2 mRNA和蛋白水平的表达情况;实时定量PCR检测感染后空载组NC-L.V-U937和实验组TEK-L.V-U937细胞mRNA水平表达的差异;ELISA检测NC-L.V-U937和TEK-L.V-U937细胞上清中细胞因子分泌的异同;增殖、迁移、小管形成实验分别观察TEK-L.V-U937细胞对内皮细胞增殖、迁移、小管形成的影响.结果:首次建立了转染Tie2基因的单核细胞系;RT-PCR及Western blot结果显示,与空载组NC-L.V-U937细胞相比,实验组TEK-L.V-U937细胞在mRNA和蛋白水平Tie2的表达显著增加,而NC-L.V-U937细胞几乎不表达Tie2;Real time-PCR结果显示,TEK-L.V-U937细胞IL-8的表达较空载组显著增加(P＜0.01),IL-10的表达也有所上升(P＞0.05);与空载组相比,TEK-L.V-U937细胞IL-8蛋白分泌明显增多(P＜0.05),VEGFA蛋白分泌量也有上升的趋势(P＞0.05),但两组细胞几乎都无EGF的分泌;TEK-L.V-U937的条件培养基刺激内皮细胞形成的小管数较多,IL-8中和抗体能抑制内皮小管的形成;NC-L.V-U937、TEK-L.V-U937饥饿培养上清对内皮细胞的迁移作用不明显(P＞0.05);增殖的第3天,与空载组相比,TEK-L.V-U937的条件培养基能显著地引起内皮细胞的增殖(P＜0.05).结论:过表达Tie2基因后显著地增加U937单核细胞系IL-8的表达,并进一步促进了内皮细胞的增殖与小管形成.
목적:탐토과표체Tie2기인후단핵세포공능적변화급대내피세포증식、천이、소관형성적영향,초보연구TEMs(Tie2-expressing monocytes)촉혈관생성적궤제.방법:건립과표체Tie2단핵세포계,형광도치현미경하관찰U937세포적감염정황,RT-PCR、Western blot분별검측감염후U937세포Tie2 mRNA화단백수평적표체정황;실시정량PCR검측감염후공재조NC-L.V-U937화실험조TEK-L.V-U937세포mRNA수평표체적차이;ELISA검측NC-L.V-U937화TEK-L.V-U937세포상청중세포인자분비적이동;증식、천이、소관형성실험분별관찰TEK-L.V-U937세포대내피세포증식、천이、소관형성적영향.결과:수차건립료전염Tie2기인적단핵세포계;RT-PCR급Western blot결과현시,여공재조NC-L.V-U937세포상비,실험조TEK-L.V-U937세포재mRNA화단백수평Tie2적표체현저증가,이NC-L.V-U937세포궤호불표체Tie2;Real time-PCR결과현시,TEK-L.V-U937세포IL-8적표체교공재조현저증가(P＜0.01),IL-10적표체야유소상승(P＞0.05);여공재조상비,TEK-L.V-U937세포IL-8단백분비명현증다(P＜0.05),VEGFA단백분비량야유상승적추세(P＞0.05),단량조세포궤호도무EGF적분비;TEK-L.V-U937적조건배양기자격내피세포형성적소관수교다,IL-8중화항체능억제내피소관적형성;NC-L.V-U937、TEK-L.V-U937기아배양상청대내피세포적천이작용불명현(P＞0.05);증식적제3천,여공재조상비,TEK-L.V-U937적조건배양기능현저지인기내피세포적증식(P＜0.05).결론:과표체Tie2기인후현저지증가U937단핵세포계IL-8적표체,병진일보촉진료내피세포적증식여소관형성.