动物营养学报
動物營養學報
동물영양학보
ACTA ZOONUTRIMENTA SINICA
2013年
1期
198-207
,共10页
季昀%庞学燕%田青%王梦芝%王洪荣%敖长金
季昀%龐學燕%田青%王夢芝%王洪榮%敖長金
계윤%방학연%전청%왕몽지%왕홍영%오장금
生长激素%胰岛素样生长因子Ⅰ%乳腺上皮细胞%乳蛋白%mRNA表达量
生長激素%胰島素樣生長因子Ⅰ%乳腺上皮細胞%乳蛋白%mRNA錶達量
생장격소%이도소양생장인자Ⅰ%유선상피세포%유단백%mRNA표체량
本试验旨在探讨生长激素(GH)和胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF-Ⅰ)对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞内调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子mRNA表达量的影响.试验对纯化后的荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞进行4种处理,对照组采用无血清生长培养基,试验组在对照组的基础上分别添加GH(100 ng/mL)、IGF-Ⅰ(l00 ng/mL)和GH(100 ng/mL)+IGF-Ⅰ(100 ng/mL).培养24 h后,采用实时定量PCR (RT-qPCR)法测定K-酪蛋白基因以及调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子的mRNA表达量,并测定生长激素受体(GHR)和胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)mRNA表达量.结果表明:体外培养的奶牛乳腺上皮细胞可以表达GHR和IGF-ⅠR mRNA,各试验组均能显著提高K-酪蛋白(CSN3)mRNA表达量(P＜0.05),但未发现GH和IGF-Ⅰ复合存在累积效应；与对照组相比,GH组有提高E74-样转录因子5(ELF5)mRNA表达量的趋势(P＜0.10),而IGF-Ⅰ组显著提高了哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和核糖体蛋白S6激酶1(rpS6K1)mRNA表达量(P＜0.05),GH+IGF-Ⅰ组未呈现加强作用.结果提示,GH和IGF-Ⅰ可能单独通过影响调控乳蛋白合成的关键激酶及调节因子mRNA表达来调节K-酪蛋白的合成.
本試驗旨在探討生長激素(GH)和胰島素樣生長因子Ⅰ (IGF-Ⅰ)對體外培養的奶牛乳腺上皮細胞內調控乳蛋白閤成的關鍵激酶及調節因子mRNA錶達量的影響.試驗對純化後的荷斯坦奶牛乳腺上皮細胞進行4種處理,對照組採用無血清生長培養基,試驗組在對照組的基礎上分彆添加GH(100 ng/mL)、IGF-Ⅰ(l00 ng/mL)和GH(100 ng/mL)+IGF-Ⅰ(100 ng/mL).培養24 h後,採用實時定量PCR (RT-qPCR)法測定K-酪蛋白基因以及調控乳蛋白閤成的關鍵激酶及調節因子的mRNA錶達量,併測定生長激素受體(GHR)和胰島素樣生長因子Ⅰ受體(IGF-ⅠR)mRNA錶達量.結果錶明:體外培養的奶牛乳腺上皮細胞可以錶達GHR和IGF-ⅠR mRNA,各試驗組均能顯著提高K-酪蛋白(CSN3)mRNA錶達量(P＜0.05),但未髮現GH和IGF-Ⅰ複閤存在纍積效應；與對照組相比,GH組有提高E74-樣轉錄因子5(ELF5)mRNA錶達量的趨勢(P＜0.10),而IGF-Ⅰ組顯著提高瞭哺乳動物雷帕黴素靶蛋白(mTOR)和覈糖體蛋白S6激酶1(rpS6K1)mRNA錶達量(P＜0.05),GH+IGF-Ⅰ組未呈現加彊作用.結果提示,GH和IGF-Ⅰ可能單獨通過影響調控乳蛋白閤成的關鍵激酶及調節因子mRNA錶達來調節K-酪蛋白的閤成.
본시험지재탐토생장격소(GH)화이도소양생장인자Ⅰ (IGF-Ⅰ)대체외배양적내우유선상피세포내조공유단백합성적관건격매급조절인자mRNA표체량적영향.시험대순화후적하사탄내우유선상피세포진행4충처리,대조조채용무혈청생장배양기,시험조재대조조적기출상분별첨가GH(100 ng/mL)、IGF-Ⅰ(l00 ng/mL)화GH(100 ng/mL)+IGF-Ⅰ(100 ng/mL).배양24 h후,채용실시정량PCR (RT-qPCR)법측정K-락단백기인이급조공유단백합성적관건격매급조절인자적mRNA표체량,병측정생장격소수체(GHR)화이도소양생장인자Ⅰ수체(IGF-ⅠR)mRNA표체량.결과표명:체외배양적내우유선상피세포가이표체GHR화IGF-ⅠR mRNA,각시험조균능현저제고K-락단백(CSN3)mRNA표체량(P＜0.05),단미발현GH화IGF-Ⅰ복합존재루적효응；여대조조상비,GH조유제고E74-양전록인자5(ELF5)mRNA표체량적추세(P＜0.10),이IGF-Ⅰ조현저제고료포유동물뢰파매소파단백(mTOR)화핵당체단백S6격매1(rpS6K1)mRNA표체량(P＜0.05),GH+IGF-Ⅰ조미정현가강작용.결과제시,GH화IGF-Ⅰ가능단독통과영향조공유단백합성적관건격매급조절인자mRNA표체래조절K-락단백적합성.
