中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
7期
1225-1229
,共5页
范珊珊%贺红焰%夏纪毅%陈枫%张奉莲%刘建
範珊珊%賀紅燄%夏紀毅%陳楓%張奉蓮%劉建
범산산%하홍염%하기의%진풍%장봉련%류건
Mas蛋白%RNA干扰%血管紧张素-(1-7)%血管紧张素Ⅱ%α-平滑肌动蛋白
Mas蛋白%RNA榦擾%血管緊張素-(1-7)%血管緊張素Ⅱ%α-平滑肌動蛋白
Mas단백%RNA간우%혈관긴장소-(1-7)%혈관긴장소Ⅱ%α-평활기동단백
Mas protein%RNA interference%Angiotensin-(1-7)%Angiotensin Ⅱ%Alpha-smooth muscle actin
目的:探讨Mas基因沉默后对血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]拮抗血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠肾间质成纤维细胞活化的影响.方法:(1)有效Mas siRNA的筛选:设计合成3对不同序列针对Mas基因的siRNA,瞬时转染大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F),实验分5组:Mas siRNA序列1、Mas siRNA序列2、Mas siRNA序列3、阴性siRNA序列及正常对照组.转染后48 h,分别用半定量RT-PCR及Western blotting检测Mas mRNA和蛋白的表达水平.(2)研究有效Mas siRNA对Ang-(1-7)拮抗AngⅡ的影响:实验分6组:正常对照组、AngⅡ组、Ang-(1-7)组、AngⅡ+Ang-(1-7)组、阴性siRNA对照组和Mas siRNA转染组.分别培养72 h后,细胞免疫化学法检测细胞活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,ELISA法检测上清液中细胞外基质成分Ⅰ型胶原(ColⅠ)的含量.结果:(1)与组相比,Mas siRNA各组Mas基因的表达均下降,其中以Mas siRNA序列2最明显(P＜0.05).(2)有效Mas siRNA转染组在加AngⅡ+Ang-(1-7)干预72 h后,较非转染组和阴性siRNA转染组α-SMA及Col Ⅰ表达均增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:Mas siRNA能有效抑制Mas的表达,使Ang-(1-7)拮抗AngⅡ诱导的大鼠肾间质成纤维细胞活化作用明显减弱.
目的:探討Mas基因沉默後對血管緊張素-(1-7)[Ang-(1-7)]拮抗血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)誘導的大鼠腎間質成纖維細胞活化的影響.方法:(1)有效Mas siRNA的篩選:設計閤成3對不同序列針對Mas基因的siRNA,瞬時轉染大鼠腎間質成纖維細胞(NRK-49F),實驗分5組:Mas siRNA序列1、Mas siRNA序列2、Mas siRNA序列3、陰性siRNA序列及正常對照組.轉染後48 h,分彆用半定量RT-PCR及Western blotting檢測Mas mRNA和蛋白的錶達水平.(2)研究有效Mas siRNA對Ang-(1-7)拮抗AngⅡ的影響:實驗分6組:正常對照組、AngⅡ組、Ang-(1-7)組、AngⅡ+Ang-(1-7)組、陰性siRNA對照組和Mas siRNA轉染組.分彆培養72 h後,細胞免疫化學法檢測細胞活化標誌物α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的錶達,ELISA法檢測上清液中細胞外基質成分Ⅰ型膠原(ColⅠ)的含量.結果:(1)與組相比,Mas siRNA各組Mas基因的錶達均下降,其中以Mas siRNA序列2最明顯(P＜0.05).(2)有效Mas siRNA轉染組在加AngⅡ+Ang-(1-7)榦預72 h後,較非轉染組和陰性siRNA轉染組α-SMA及Col Ⅰ錶達均增加,差異有統計學意義(P＜0.05).結論:Mas siRNA能有效抑製Mas的錶達,使Ang-(1-7)拮抗AngⅡ誘導的大鼠腎間質成纖維細胞活化作用明顯減弱.
목적:탐토Mas기인침묵후대혈관긴장소-(1-7)[Ang-(1-7)]길항혈관긴장소Ⅱ(AngⅡ)유도적대서신간질성섬유세포활화적영향.방법:(1)유효Mas siRNA적사선:설계합성3대불동서렬침대Mas기인적siRNA,순시전염대서신간질성섬유세포(NRK-49F),실험분5조:Mas siRNA서렬1、Mas siRNA서렬2、Mas siRNA서렬3、음성siRNA서렬급정상대조조.전염후48 h,분별용반정량RT-PCR급Western blotting검측Mas mRNA화단백적표체수평.(2)연구유효Mas siRNA대Ang-(1-7)길항AngⅡ적영향:실험분6조:정상대조조、AngⅡ조、Ang-(1-7)조、AngⅡ+Ang-(1-7)조、음성siRNA대조조화Mas siRNA전염조.분별배양72 h후,세포면역화학법검측세포활화표지물α-평활기기동단백(α-SMA)적표체,ELISA법검측상청액중세포외기질성분Ⅰ형효원(ColⅠ)적함량.결과:(1)여조상비,Mas siRNA각조Mas기인적표체균하강,기중이Mas siRNA서렬2최명현(P＜0.05).(2)유효Mas siRNA전염조재가AngⅡ+Ang-(1-7)간예72 h후,교비전염조화음성siRNA전염조α-SMA급Col Ⅰ표체균증가,차이유통계학의의(P＜0.05).결론:Mas siRNA능유효억제Mas적표체,사Ang-(1-7)길항AngⅡ유도적대서신간질성섬유세포활화작용명현감약.
