中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2013年
7期
1213-1218
,共6页
潘巍巍%徐营%曹利仙%沈忠飞%郭连军%宋方洲
潘巍巍%徐營%曹利仙%瀋忠飛%郭連軍%宋方洲
반외외%서영%조리선%침충비%곽련군%송방주
hWAPL蛋白%短发夹RNA%细胞凋亡%CaSki细胞
hWAPL蛋白%短髮夾RNA%細胞凋亡%CaSki細胞
hWAPL단백%단발협RNA%세포조망%CaSki세포
hWAPL protein%Short hairpin RNA%Apoptosis%CaSki cells
目的:为探讨人半翼(hWAPL)蛋白在细胞增殖与凋亡中的作用及其作为分子靶点用于肿瘤治疗的潜在价值,本研究用RNA干扰技术抑制hWAPL基因的表达,并观察了其对人宫颈癌细胞CaSki细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法:实时荧光定量PCR和Western blotting检测hWAPL shRNA的干扰效率；MTT检测细胞增殖；Annexin V-PE和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡；蛋白质印迹分析凋亡蛋白cleaved caspase-3和细胞周期抑制蛋白p21、p27的表达.裸鼠荷瘤模型体内研究hWAPL沉默对CaSki细胞增殖的影响.结果:实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果表明,筛选到的hWAPL shRNA能有效抑制内源hWAPL的表达.MTT实验表明shRNA介导的hWAPL表达沉默显著抑制CaSki细胞的增殖.Annexin V-PE分析结果表明,hWAPL沉默增加了凋亡细胞数目.细胞核经Hoechst 33258染色出现浓染致密的固缩形态和颗粒状荧光；蛋白质印迹结果显示cleaved caspase-3、p21和p27表达增加；裸鼠成瘤实验表明,hWAPL沉默的肿瘤体积减小,增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达增加.结论:hWAPL沉默抑制CaSki细胞增殖,促进细胞凋亡,是一个潜在的肿瘤治疗新靶点.
目的:為探討人半翼(hWAPL)蛋白在細胞增殖與凋亡中的作用及其作為分子靶點用于腫瘤治療的潛在價值,本研究用RNA榦擾技術抑製hWAPL基因的錶達,併觀察瞭其對人宮頸癌細胞CaSki細胞增殖和細胞凋亡的影響.方法:實時熒光定量PCR和Western blotting檢測hWAPL shRNA的榦擾效率；MTT檢測細胞增殖；Annexin V-PE和Hoechst 33258染色檢測細胞凋亡；蛋白質印跡分析凋亡蛋白cleaved caspase-3和細胞週期抑製蛋白p21、p27的錶達.裸鼠荷瘤模型體內研究hWAPL沉默對CaSki細胞增殖的影響.結果:實時熒光定量PCR和Western blotting檢測結果錶明,篩選到的hWAPL shRNA能有效抑製內源hWAPL的錶達.MTT實驗錶明shRNA介導的hWAPL錶達沉默顯著抑製CaSki細胞的增殖.Annexin V-PE分析結果錶明,hWAPL沉默增加瞭凋亡細胞數目.細胞覈經Hoechst 33258染色齣現濃染緻密的固縮形態和顆粒狀熒光；蛋白質印跡結果顯示cleaved caspase-3、p21和p27錶達增加；裸鼠成瘤實驗錶明,hWAPL沉默的腫瘤體積減小,增殖細胞覈抗原(PCNA)蛋白錶達增加.結論:hWAPL沉默抑製CaSki細胞增殖,促進細胞凋亡,是一箇潛在的腫瘤治療新靶點.
목적:위탐토인반익(hWAPL)단백재세포증식여조망중적작용급기작위분자파점용우종류치료적잠재개치,본연구용RNA간우기술억제hWAPL기인적표체,병관찰료기대인궁경암세포CaSki세포증식화세포조망적영향.방법:실시형광정량PCR화Western blotting검측hWAPL shRNA적간우효솔；MTT검측세포증식；Annexin V-PE화Hoechst 33258염색검측세포조망；단백질인적분석조망단백cleaved caspase-3화세포주기억제단백p21、p27적표체.라서하류모형체내연구hWAPL침묵대CaSki세포증식적영향.결과:실시형광정량PCR화Western blotting검측결과표명,사선도적hWAPL shRNA능유효억제내원hWAPL적표체.MTT실험표명shRNA개도적hWAPL표체침묵현저억제CaSki세포적증식.Annexin V-PE분석결과표명,hWAPL침묵증가료조망세포수목.세포핵경Hoechst 33258염색출현농염치밀적고축형태화과립상형광；단백질인적결과현시cleaved caspase-3、p21화p27표체증가；라서성류실험표명,hWAPL침묵적종류체적감소,증식세포핵항원(PCNA)단백표체증가.결론:hWAPL침묵억제CaSki세포증식,촉진세포조망,시일개잠재적종류치료신파점.
