复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2013年
2期
180-186
,共7页
马桂芬%缪青%刘以梅%陈世耀
馬桂芬%繆青%劉以梅%陳世耀
마계분%무청%류이매%진세요
叉头样蛋白3(FoxP3)%胃癌%外周血单个核细胞(PBMCs)%共培养
扠頭樣蛋白3(FoxP3)%胃癌%外週血單箇覈細胞(PBMCs)%共培養
차두양단백3(FoxP3)%위암%외주혈단개핵세포(PBMCs)%공배양
目的 检测叉头样蛋白3(forkhead box protein 3,FoxP3)在胃癌细胞中的表达分布,并探讨其在外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)和胃癌细胞共培养过程中的作用.方法 应用免疫荧光技术检测FoxP3蛋白的表达定位；建立胃癌细胞和PBMCs的体外共培养体系,然后用CCK-8法检测共培养后胃癌细胞的生长抑制情况；通过Real-time PCR技术检测共培养后胃癌细胞和PBMCs中FoxP3 mRNA表达情况；并采用流式细胞技术和Western blot技术检测共培养后两种细胞中FoxP3蛋白表达情况.结果 FoxP3表达于胃癌细胞的胞质和胞核.胃癌细胞与PBMCs共培养时能明显抑制胃癌细胞的增殖.直接和间接共培养后MKN28胃癌细胞的FoxP3蛋白的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)均增加(P=0.031;P=0.015)；与单培养相比,来源于胃癌患者和健康对照组的淋巴细胞与胃癌细胞共培养后其FoxP3 MFI均明显增加(P=0.016;P=0.034),且IL-2能促进间接培养条件下PBMCs的FoxP3表达(P=0.024),而对直接共培养影响不大.共培养后胃癌细胞的FoxP3 mRNA和蛋白表达均增加,直接共培养较间接共培养增加更明显(P=0.035).结论 胃癌细胞与PBMCs的相互作用主要依赖细胞间的直接接触方式,FoxP3的表达变化在这一过程中发挥了重要作用,这可能跟肿瘤免疫逃逸有关.
目的 檢測扠頭樣蛋白3(forkhead box protein 3,FoxP3)在胃癌細胞中的錶達分佈,併探討其在外週血單箇覈細胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)和胃癌細胞共培養過程中的作用.方法 應用免疫熒光技術檢測FoxP3蛋白的錶達定位；建立胃癌細胞和PBMCs的體外共培養體繫,然後用CCK-8法檢測共培養後胃癌細胞的生長抑製情況；通過Real-time PCR技術檢測共培養後胃癌細胞和PBMCs中FoxP3 mRNA錶達情況；併採用流式細胞技術和Western blot技術檢測共培養後兩種細胞中FoxP3蛋白錶達情況.結果 FoxP3錶達于胃癌細胞的胞質和胞覈.胃癌細胞與PBMCs共培養時能明顯抑製胃癌細胞的增殖.直接和間接共培養後MKN28胃癌細胞的FoxP3蛋白的平均熒光彊度(mean fluorescence intensity,MFI)均增加(P=0.031;P=0.015)；與單培養相比,來源于胃癌患者和健康對照組的淋巴細胞與胃癌細胞共培養後其FoxP3 MFI均明顯增加(P=0.016;P=0.034),且IL-2能促進間接培養條件下PBMCs的FoxP3錶達(P=0.024),而對直接共培養影響不大.共培養後胃癌細胞的FoxP3 mRNA和蛋白錶達均增加,直接共培養較間接共培養增加更明顯(P=0.035).結論 胃癌細胞與PBMCs的相互作用主要依賴細胞間的直接接觸方式,FoxP3的錶達變化在這一過程中髮揮瞭重要作用,這可能跟腫瘤免疫逃逸有關.
목적 검측차두양단백3(forkhead box protein 3,FoxP3)재위암세포중적표체분포,병탐토기재외주혈단개핵세포(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)화위암세포공배양과정중적작용.방법 응용면역형광기술검측FoxP3단백적표체정위；건립위암세포화PBMCs적체외공배양체계,연후용CCK-8법검측공배양후위암세포적생장억제정황；통과Real-time PCR기술검측공배양후위암세포화PBMCs중FoxP3 mRNA표체정황；병채용류식세포기술화Western blot기술검측공배양후량충세포중FoxP3단백표체정황.결과 FoxP3표체우위암세포적포질화포핵.위암세포여PBMCs공배양시능명현억제위암세포적증식.직접화간접공배양후MKN28위암세포적FoxP3단백적평균형광강도(mean fluorescence intensity,MFI)균증가(P=0.031;P=0.015)；여단배양상비,래원우위암환자화건강대조조적림파세포여위암세포공배양후기FoxP3 MFI균명현증가(P=0.016;P=0.034),차IL-2능촉진간접배양조건하PBMCs적FoxP3표체(P=0.024),이대직접공배양영향불대.공배양후위암세포적FoxP3 mRNA화단백표체균증가,직접공배양교간접공배양증가경명현(P=0.035).결론 위암세포여PBMCs적상호작용주요의뢰세포간적직접접촉방식,FoxP3적표체변화재저일과정중발휘료중요작용,저가능근종류면역도일유관.
