CAJ | 학술논문

为了探索转座子介导技术在鸡胚中的转染效果,本研究采用鸡蛋开窗法将Sleeping Beauty (SB)单质粒转座载体pT2-SV40-EGFP-SB11注射至孵化36 h鸡(Gallus domes ticus)胚盘中,同时设开窗不注射组和不开窗组.利用体视荧光显微镜和RT-PCR方法检测增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)表达率,并比较不同阶段的胚胎成活率、孵化率以及蛋重变化.结果表明,EGFP在鸡胚胎中获得较高的表达率(40％～89％)；开窗组和不开窗组在胚胎发育早期蛋重变化差异不显著(P＞0.05),而后期开窗注射组的蛋重比例显著低于不开窗组(P＜0.05)；三组胚胎的成活率和孵化率在整个发育过程中变化显著(P＜0.05).本实验初步证明了经改良的鸡蛋开窗法可用于鸡胚转基因研究,并初步建立了SB转座子介导外源基因在鸡胚中转染方法.
위료탐색전좌자개도기술재계배중적전염효과,본연구채용계단개창법장Sleeping Beauty (SB)단질립전좌재체pT2-SV40-EGFP-SB11주사지부화36 h계(Gallus domes ticus)배반중,동시설개창불주사조화불개창조.이용체시형광현미경화RT-PCR방법검측증강형록색형광단백기인(EGFP)표체솔,병비교불동계단적배태성활솔、부화솔이급단중변화.결과표명,EGFP재계배태중획득교고적표체솔(40％～89％)；개창조화불개창조재배태발육조기단중변화차이불현저(P＞0.05),이후기개창주사조적단중비례현저저우불개창조(P＜0.05)；삼조배태적성활솔화부화솔재정개발육과정중변화현저(P＜0.05).본실험초보증명료경개량적계단개창법가용우계배전기인연구,병초보건립료SB전좌자개도외원기인재계배중전염방법.