CAJ | 학술논문

目的探讨RNA干扰沉默信号转导和转录激活因子3(STAT3)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的影响.方法取本院2012年2-12月行关节镜滑膜切除的RA患者的滑膜组织,先进行RA FLS培养.将FLS分为5组:空白组(正常培养的FLS)、阴性对照组(加入空白质粒的FLS)、RNAi-1组、RNAi-2组和RNAi-3组,后3个组均加入靶向小干扰RNA(siRNA)的重组质粒,分别针对3个不同的靶点.然后用反转录聚合酶链反应和免疫印迹法分别检测各组FLS中STAT3 mRNA及其蛋白的表达情况;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测FLS增殖情况[以490 nm处的吸光度(A)值代表活细胞数量].结果 (1)在转染RA FLS后,空白组、阴性对照组、RNAi-1组、RNAi-2组和RNAi-3组STAT3 mRNA表达抑制率分别为(27.32±2.06)%、(30.61±2.47)%、(76.99±2.05)%、(72.75±1.74)%和(66.50±2.47)%,STAT3表达抑制率分别为(44.35±2.04)%、(43.10±2.59)%、(83.57±1.56)%、(77.05±0.54)%和(69.44±2.76)%,5组STAT3 mRNA及其蛋白表达抑制率间差异均有统计学意义(F值分别为362.92和248.08;P＜0.01);其中RNAi-1组、RNAi-2组和RNAi-3组STAT3 mRNA及其蛋白表达抑制率均高于空白组、阴性对照组(P＜0.05).(2)空白组、阴性对照组以及RNAi组(即RNAi-1组)A值分别为(0.553 3±0.343 2)、(0.535 0±0.337 3)和(0.158 3±0.079 4),3组间差异有统计学意义(F=3.761,P=0.047);其中空白组A值与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P=0.912);RNAi组A值均低于空白组、阴性对照组(P值分别为0.028和0.035).结论 RNA干扰沉默STAT3能够有效抑制RA FLS中STAT3 mRNA及其蛋白的表达,并能明显抑制FLS的增殖.
목적 탐토RNA간우침묵신호전도화전록격활인자3(STAT3)대류풍습관절염(RA)성섬유양활막세포(FLS)증식적영향.방법 취본원2012년2-12월행관절경활막절제적RA환자적활막조직,선진행RA FLS배양.장FLS분위5조:공백조(정상배양적FLS)、음성대조조(가입공백질립적FLS)、RNAi-1조、RNAi-2조화RNAi-3조,후3개조균가입파향소간우RNA(siRNA)적중조질립,분별침대3개불동적파점.연후용반전록취합매련반응화면역인적법분별검측각조FLS중STAT3 mRNA급기단백적표체정황;용사갑기우담서람(MTT)법검측FLS증식정황[이490 nm처적흡광도(A)치대표활세포수량].결과 (1)재전염RA FLS후,공백조、음성대조조、RNAi-1조、RNAi-2조화RNAi-3조STAT3 mRNA표체억제솔분별위(27.32±2.06)%、(30.61±2.47)%、(76.99±2.05)%、(72.75±1.74)%화(66.50±2.47)%,STAT3표체억제솔분별위(44.35±2.04)%、(43.10±2.59)%、(83.57±1.56)%、(77.05±0.54)%화(69.44±2.76)%,5조STAT3 mRNA급기단백표체억제솔간차이균유통계학의의(F치분별위362.92화248.08;P＜0.01);기중RNAi-1조、RNAi-2조화RNAi-3조STAT3 mRNA급기단백표체억제솔균고우공백조、음성대조조(P＜0.05).(2)공백조、음성대조조이급RNAi조(즉RNAi-1조)A치분별위(0.553 3±0.343 2)、(0.535 0±0.337 3)화(0.158 3±0.079 4),3조간차이유통계학의의(F=3.761,P=0.047);기중공백조A치여음성대조조비교,차이무통계학의의(P=0.912);RNAi조A치균저우공백조、음성대조조(P치분별위0.028화0.035).결론 RNA간우침묵STAT3능구유효억제RA FLS중STAT3 mRNA급기단백적표체,병능명현억제FLS적증식.