中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2013年
1期
69-73
,共5页
许道艳%刘磊%刘仁沿%梁玉波
許道豔%劉磊%劉仁沿%樑玉波
허도염%류뢰%류인연%량옥파
麻痹性贝毒%石房蛤毒素%单克隆抗体%酶联免疫吸附分析
痳痺性貝毒%石房蛤毒素%單剋隆抗體%酶聯免疫吸附分析
마비성패독%석방합독소%단극륭항체%매련면역흡부분석
目的:利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备麻痹性贝毒(PSP)的单克隆抗体,以便建立快速、灵敏、有效的毒素检测方法.方法:采用甲醛法将半抗原石房蛤毒素(STX)与血蓝蛋白(KLH)偶联制备成完全抗原STX-KLH,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,HAT选择培养杂交瘤细胞,利用ELISA方法筛选出分泌抗STX-McAB的杂交瘤细胞株,并通过小鼠体内诱生腹水的方法获得单克隆抗体.结果:共获得4株能稳定分泌麻痹性贝毒抗体的阳性细胞株,建立了分析检测麻痹性贝毒的间接竞争酶联免疫方法.对PSP中STX组分的检出限为20 ng/ml,IC50为220 ng/ml;对GTX2/3的检出限为10 ng/ml,IC5o为50 ng/ml.结论:所制备抗体具有高特异性和灵敏性,可用于研制高质量的国产快速检测麻痹性贝毒ELISA试剂盒.
目的:利用B淋巴細胞雜交瘤技術製備痳痺性貝毒(PSP)的單剋隆抗體,以便建立快速、靈敏、有效的毒素檢測方法.方法:採用甲醛法將半抗原石房蛤毒素(STX)與血藍蛋白(KLH)偶聯製備成完全抗原STX-KLH,免疫BALB/c小鼠,取其脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞融閤,經篩選和剋隆,HAT選擇培養雜交瘤細胞,利用ELISA方法篩選齣分泌抗STX-McAB的雜交瘤細胞株,併通過小鼠體內誘生腹水的方法穫得單剋隆抗體.結果:共穫得4株能穩定分泌痳痺性貝毒抗體的暘性細胞株,建立瞭分析檢測痳痺性貝毒的間接競爭酶聯免疫方法.對PSP中STX組分的檢齣限為20 ng/ml,IC50為220 ng/ml;對GTX2/3的檢齣限為10 ng/ml,IC5o為50 ng/ml.結論:所製備抗體具有高特異性和靈敏性,可用于研製高質量的國產快速檢測痳痺性貝毒ELISA試劑盒.
목적:이용B림파세포잡교류기술제비마비성패독(PSP)적단극륭항체,이편건립쾌속、령민、유효적독소검측방법.방법:채용갑철법장반항원석방합독소(STX)여혈람단백(KLH)우련제비성완전항원STX-KLH,면역BALB/c소서,취기비세포여SP2/0골수류세포융합,경사선화극륭,HAT선택배양잡교류세포,이용ELISA방법사선출분비항STX-McAB적잡교류세포주,병통과소서체내유생복수적방법획득단극륭항체.결과:공획득4주능은정분비마비성패독항체적양성세포주,건립료분석검측마비성패독적간접경쟁매련면역방법.대PSP중STX조분적검출한위20 ng/ml,IC50위220 ng/ml;대GTX2/3적검출한위10 ng/ml,IC5o위50 ng/ml.결론:소제비항체구유고특이성화령민성,가용우연제고질량적국산쾌속검측마비성패독ELISA시제합.
