复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2013年
2期
148-152,158
,共6页
赵超%李宗伟%付荣%赵亚蕊%史通麟%李卓玉
趙超%李宗偉%付榮%趙亞蕊%史通麟%李卓玉
조초%리종위%부영%조아예%사통린%리탁옥
胰蛋白酶抑制剂(TI)%葡萄糖调节蛋白78(GRP78)%大肠癌%靶向药物
胰蛋白酶抑製劑(TI)%葡萄糖調節蛋白78(GRP78)%大腸癌%靶嚮藥物
이단백매억제제(TI)%포도당조절단백78(GRP78)%대장암%파향약물
目的 构建以肿瘤细胞表面葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)为靶向的重组绿豆胰蛋白酶抑制剂(trypsin inhibitor,TI)活性片段GBP-TI,并探讨其抗肠癌的分子靶向效应.方法 用带有GRP78结合肽(GRP78 binding peptide,GBP)表达序列的引物PCR扩增胰蛋白酶抑制剂活性片段,构建GBP-TI的原核表达载体；采用GST亲和层析柱纯化获得GBP-TI蛋白；激光共聚焦方法检测GBP-TI与GRP78的相互作用；MTT和DAH细胞核染色方法分别检测GBP-TI对大肠癌细胞存活和凋亡的影响.结果 GBP-TI能够与大肠癌细胞表面的GRP78相互作用；与GST-TI相比,GBP-TI能够剂量依赖性地诱导大肠癌细胞死亡,而对正常细胞生长无明显影响.结论 GBP-TI可以通过结合肿瘤细胞表面GRP78蛋白特异性杀伤肿瘤细胞.本研究为肿瘤靶向治疗提供了一种新的策略.
目的 構建以腫瘤細胞錶麵葡萄糖調節蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)為靶嚮的重組綠豆胰蛋白酶抑製劑(trypsin inhibitor,TI)活性片段GBP-TI,併探討其抗腸癌的分子靶嚮效應.方法 用帶有GRP78結閤肽(GRP78 binding peptide,GBP)錶達序列的引物PCR擴增胰蛋白酶抑製劑活性片段,構建GBP-TI的原覈錶達載體；採用GST親和層析柱純化穫得GBP-TI蛋白；激光共聚焦方法檢測GBP-TI與GRP78的相互作用；MTT和DAH細胞覈染色方法分彆檢測GBP-TI對大腸癌細胞存活和凋亡的影響.結果 GBP-TI能夠與大腸癌細胞錶麵的GRP78相互作用；與GST-TI相比,GBP-TI能夠劑量依賴性地誘導大腸癌細胞死亡,而對正常細胞生長無明顯影響.結論 GBP-TI可以通過結閤腫瘤細胞錶麵GRP78蛋白特異性殺傷腫瘤細胞.本研究為腫瘤靶嚮治療提供瞭一種新的策略.
목적 구건이종류세포표면포도당조절단백78(glucose-regulated protein 78,GRP78)위파향적중조록두이단백매억제제(trypsin inhibitor,TI)활성편단GBP-TI,병탐토기항장암적분자파향효응.방법 용대유GRP78결합태(GRP78 binding peptide,GBP)표체서렬적인물PCR확증이단백매억제제활성편단,구건GBP-TI적원핵표체재체；채용GST친화층석주순화획득GBP-TI단백；격광공취초방법검측GBP-TI여GRP78적상호작용；MTT화DAH세포핵염색방법분별검측GBP-TI대대장암세포존활화조망적영향.결과 GBP-TI능구여대장암세포표면적GRP78상호작용；여GST-TI상비,GBP-TI능구제량의뢰성지유도대장암세포사망,이대정상세포생장무명현영향.결론 GBP-TI가이통과결합종류세포표면GRP78단백특이성살상종류세포.본연구위종류파향치료제공료일충신적책략.
