实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2013年
3期
349-351
,共3页
陈金梅%邓全军%谢立群%赵建业%刘彩虹%郑艳敏
陳金梅%鄧全軍%謝立群%趙建業%劉綵虹%鄭豔敏
진금매%산전군%사립군%조건업%류채홍%정염민
食管肿瘤%EC109%小干扰RNA%蛋白酶激活受体2%基因沉默
食管腫瘤%EC109%小榦擾RNA%蛋白酶激活受體2%基因沉默
식관종류%EC109%소간우RNA%단백매격활수체2%기인침묵
目的:构建靶向蛋白酶激活受体-2(PAR-2)基因的shRNA表达质粒,建立PAR-2基因沉默的食管癌EC109稳定细胞株.方法:针对人PAR-2的mRNA序列,设计并体外合成编码shRNA的两条特异性寡核苷酸序列,分别插入pGFP-V-RS质粒中构建2个shRNA表达质粒(PAR-2 shRNA-1、PAR-2 shRNA-2),经过鉴定,然后将表达质粒转染至食管癌细胞EC109中,经嘌呤霉素筛选,获得稳定干扰的细胞株,运用RT-PCR和Western Blot检测PAR-2的表达.结果:PAR-2 shRNA-1转染人食管癌细胞EC109后,PAR-2基因表达在mRNA和蛋白质水平都受到显著抑制,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:成功构建针对PAR-2基因的shRNA表达质粒,转染食管癌细胞EC109,能有效抑制该细胞株PAR-2基因的表达.
目的:構建靶嚮蛋白酶激活受體-2(PAR-2)基因的shRNA錶達質粒,建立PAR-2基因沉默的食管癌EC109穩定細胞株.方法:針對人PAR-2的mRNA序列,設計併體外閤成編碼shRNA的兩條特異性寡覈苷痠序列,分彆插入pGFP-V-RS質粒中構建2箇shRNA錶達質粒(PAR-2 shRNA-1、PAR-2 shRNA-2),經過鑒定,然後將錶達質粒轉染至食管癌細胞EC109中,經嘌呤黴素篩選,穫得穩定榦擾的細胞株,運用RT-PCR和Western Blot檢測PAR-2的錶達.結果:PAR-2 shRNA-1轉染人食管癌細胞EC109後,PAR-2基因錶達在mRNA和蛋白質水平都受到顯著抑製,差異有統計學意義(P＜0.05).結論:成功構建針對PAR-2基因的shRNA錶達質粒,轉染食管癌細胞EC109,能有效抑製該細胞株PAR-2基因的錶達.
목적:구건파향단백매격활수체-2(PAR-2)기인적shRNA표체질립,건립PAR-2기인침묵적식관암EC109은정세포주.방법:침대인PAR-2적mRNA서렬,설계병체외합성편마shRNA적량조특이성과핵감산서렬,분별삽입pGFP-V-RS질립중구건2개shRNA표체질립(PAR-2 shRNA-1、PAR-2 shRNA-2),경과감정,연후장표체질립전염지식관암세포EC109중,경표령매소사선,획득은정간우적세포주,운용RT-PCR화Western Blot검측PAR-2적표체.결과:PAR-2 shRNA-1전염인식관암세포EC109후,PAR-2기인표체재mRNA화단백질수평도수도현저억제,차이유통계학의의(P＜0.05).결론:성공구건침대PAR-2기인적shRNA표체질립,전염식관암세포EC109,능유효억제해세포주PAR-2기인적표체.
