安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
4期
1432-1434
,共3页
张春燕%严冬梅%段春燕%杨烨%刘秋均
張春燕%嚴鼕梅%段春燕%楊燁%劉鞦均
장춘연%엄동매%단춘연%양엽%류추균
双向电泳%蛋白质组%青果%肝星状细胞%大鼠
雙嚮電泳%蛋白質組%青果%肝星狀細胞%大鼠
쌍향전영%단백질조%청과%간성상세포%대서
[目的]建立青果作用后大鼠肝星状细胞蛋白质组双向电泳分离体系,提高其分辨率和重复性.[方法]青果作用于大鼠肝星状细胞,提取全蛋白,按标准条件对蛋白质进行双向电泳分离,并对各关键因素进行优化.[结果]最终选择的裂解液配方是1％TBP、4％CHAPS、0.2％ Bio-Lyte、40 mmol/L Tris、8 mol/L尿素、2 mol/L硫脲；使用pH 4 ～7的IPG胶条进行被动水化上样,等电聚焦采用缓慢升压模式,电泳参数根据Bio-Rad公司的预设方案进行调整；使用改良硝酸银法进行蛋白质斑点染色,从而获得了满意的蛋白质组双向电泳图谱.[结论]成功建立了青果作用后大鼠肝星状细胞蛋白质组双向电泳分离体系,具有较高的分辨率和重复性,为进一步较为系统、全面、准确的评价青果及其复方制剂的作用机制和药效提供方法学基础.
[目的]建立青果作用後大鼠肝星狀細胞蛋白質組雙嚮電泳分離體繫,提高其分辨率和重複性.[方法]青果作用于大鼠肝星狀細胞,提取全蛋白,按標準條件對蛋白質進行雙嚮電泳分離,併對各關鍵因素進行優化.[結果]最終選擇的裂解液配方是1％TBP、4％CHAPS、0.2％ Bio-Lyte、40 mmol/L Tris、8 mol/L尿素、2 mol/L硫脲；使用pH 4 ～7的IPG膠條進行被動水化上樣,等電聚焦採用緩慢升壓模式,電泳參數根據Bio-Rad公司的預設方案進行調整；使用改良硝痠銀法進行蛋白質斑點染色,從而穫得瞭滿意的蛋白質組雙嚮電泳圖譜.[結論]成功建立瞭青果作用後大鼠肝星狀細胞蛋白質組雙嚮電泳分離體繫,具有較高的分辨率和重複性,為進一步較為繫統、全麵、準確的評價青果及其複方製劑的作用機製和藥效提供方法學基礎.
[목적]건립청과작용후대서간성상세포단백질조쌍향전영분리체계,제고기분변솔화중복성.[방법]청과작용우대서간성상세포,제취전단백,안표준조건대단백질진행쌍향전영분리,병대각관건인소진행우화.[결과]최종선택적렬해액배방시1％TBP、4％CHAPS、0.2％ Bio-Lyte、40 mmol/L Tris、8 mol/L뇨소、2 mol/L류뇨；사용pH 4 ～7적IPG효조진행피동수화상양,등전취초채용완만승압모식,전영삼수근거Bio-Rad공사적예설방안진행조정；사용개량초산은법진행단백질반점염색,종이획득료만의적단백질조쌍향전영도보.[결론]성공건립료청과작용후대서간성상세포단백질조쌍향전영분리체계,구유교고적분변솔화중복성,위진일보교위계통、전면、준학적평개청과급기복방제제적작용궤제화약효제공방법학기출.
