解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2013年
1期
34-38
,共5页
冯海凉%杨振丽%张宏%刘玉琴
馮海涼%楊振麗%張宏%劉玉琴
풍해량%양진려%장굉%류옥금
诱导多能干细胞%病毒感染%碱性磷酸酶染色%反转录-聚合酶链反应%小鼠
誘導多能榦細胞%病毒感染%堿性燐痠酶染色%反轉錄-聚閤酶鏈反應%小鼠
유도다능간세포%병독감염%감성린산매염색%반전록-취합매련반응%소서
目的 建立小鼠诱导多能性干细胞(iPSCs)模型,为干细胞和iPSCs研究提供可利用资源.方法 取C57BL/6J小鼠12.5d的胚胎成纤维细胞,感染含有Sox2、Oct4、Klf4和c-Myc的慢病毒进行重编程.病毒感染后12d挑取iPSCs的克隆进行扩大培养,进行碱性磷酸酶染色鉴定.体外悬滴培养检测拟胚体(EB)的形成,并皮下接种BABL/c裸鼠检测畸胎瘤形成.全反式维甲酸诱导iPSCs克隆株定向分化.PCR法进行种属鉴定并检测支原体.结果 得到了12个碱性磷酸酶阳性的小鼠iPSCs克隆株,体外可以形成拟胚体,其中9个克隆株可以在BALB/c裸鼠体内形成畸胎瘤.全反式维甲酸可诱导iPSCs定向分化为平滑肌细胞.iPSCs克隆株种属鉴定为鼠源性,无支原体的污染,细胞资源中心入库保藏.结论 成功建立了小鼠iPSCs模型,为干细胞、iPSCs重编程机制及定向分化研究提供可利用的资源.
目的 建立小鼠誘導多能性榦細胞(iPSCs)模型,為榦細胞和iPSCs研究提供可利用資源.方法 取C57BL/6J小鼠12.5d的胚胎成纖維細胞,感染含有Sox2、Oct4、Klf4和c-Myc的慢病毒進行重編程.病毒感染後12d挑取iPSCs的剋隆進行擴大培養,進行堿性燐痠酶染色鑒定.體外懸滴培養檢測擬胚體(EB)的形成,併皮下接種BABL/c裸鼠檢測畸胎瘤形成.全反式維甲痠誘導iPSCs剋隆株定嚮分化.PCR法進行種屬鑒定併檢測支原體.結果 得到瞭12箇堿性燐痠酶暘性的小鼠iPSCs剋隆株,體外可以形成擬胚體,其中9箇剋隆株可以在BALB/c裸鼠體內形成畸胎瘤.全反式維甲痠可誘導iPSCs定嚮分化為平滑肌細胞.iPSCs剋隆株種屬鑒定為鼠源性,無支原體的汙染,細胞資源中心入庫保藏.結論 成功建立瞭小鼠iPSCs模型,為榦細胞、iPSCs重編程機製及定嚮分化研究提供可利用的資源.
목적 건립소서유도다능성간세포(iPSCs)모형,위간세포화iPSCs연구제공가이용자원.방법 취C57BL/6J소서12.5d적배태성섬유세포,감염함유Sox2、Oct4、Klf4화c-Myc적만병독진행중편정.병독감염후12d도취iPSCs적극륭진행확대배양,진행감성린산매염색감정.체외현적배양검측의배체(EB)적형성,병피하접충BABL/c라서검측기태류형성.전반식유갑산유도iPSCs극륭주정향분화.PCR법진행충속감정병검측지원체.결과 득도료12개감성린산매양성적소서iPSCs극륭주,체외가이형성의배체,기중9개극륭주가이재BALB/c라서체내형성기태류.전반식유갑산가유도iPSCs정향분화위평활기세포.iPSCs극륭주충속감정위서원성,무지원체적오염,세포자원중심입고보장.결론 성공건립료소서iPSCs모형,위간세포、iPSCs중편정궤제급정향분화연구제공가이용적자원.
