中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2013年
2期
148-153,167
,共7页
脑炎,日本%DNA疫苗%细胞间粘附分子1%树突状细胞%共刺激分子
腦炎,日本%DNA疫苗%細胞間粘附分子1%樹突狀細胞%共刺激分子
뇌염,일본%DNA역묘%세포간점부분자1%수돌상세포%공자격분자
目的:研究细胞间粘附分子1(ICAM-1)编码基因对日本脑炎(JE) DNA疫苗脾脏树突状细胞功能的影响.方法:套式RT-PCR法获取BALB/c鼠ICAM-1编码基因,构建重组子pJME/ICAM-1和pICAM-1,脂质体法转染上述质粒于CHO细胞,Western blot法检测转染的CHO细胞中目的蛋白表达.实验分5组,包括:pJME/ICAM-1、pJME+ PICAM-1、pJME、JE灭活疫苗和pcDNA3.1(+)免疫组,以不同免疫原肌注免疫BALB/c小鼠,流式细胞仪检测经不同免疫原免疫鼠后脾脏DC表型、抗原吞噬功能以及混合淋巴细胞反应.结果:融合表达重组质粒pJME/ICAM-1和单质粒pICAM-1经鉴定构建正确.pJME/ICAM-1组CD11c+CD86+ DC和CD11c+ICAM-1+ DC比例分别为(6.92±1.40)％、(7.18±0.57)％,高于其它免疫组(均P＜0.05)；pJME/ICAM-1和pJME+ pICAM-1组DC表面CD80和MHCⅡ表达水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)；pJME/ICAM-1与pJME+ pICAM-1组内吞能力明显增强,平均荧光强度分别为437.11 ±47.60、416.67±29.12,显著高于其它组(P＜0.05).比较不同免疫原对细胞分裂的作用,以pJME/ICAM-1组最强,(73.69±7.32)％ CD4+T细胞发生分裂,(45.40 ±2.57)％CD8 +T细胞发生分裂,显著高于对照组(P＜0.05).结论:ICAM-1编码基因能够促进JE DNA疫苗脾脏树突状细胞的成熟,能够提供独立或放大B7分子的协同刺激信号.
目的:研究細胞間粘附分子1(ICAM-1)編碼基因對日本腦炎(JE) DNA疫苗脾髒樹突狀細胞功能的影響.方法:套式RT-PCR法穫取BALB/c鼠ICAM-1編碼基因,構建重組子pJME/ICAM-1和pICAM-1,脂質體法轉染上述質粒于CHO細胞,Western blot法檢測轉染的CHO細胞中目的蛋白錶達.實驗分5組,包括:pJME/ICAM-1、pJME+ PICAM-1、pJME、JE滅活疫苗和pcDNA3.1(+)免疫組,以不同免疫原肌註免疫BALB/c小鼠,流式細胞儀檢測經不同免疫原免疫鼠後脾髒DC錶型、抗原吞噬功能以及混閤淋巴細胞反應.結果:融閤錶達重組質粒pJME/ICAM-1和單質粒pICAM-1經鑒定構建正確.pJME/ICAM-1組CD11c+CD86+ DC和CD11c+ICAM-1+ DC比例分彆為(6.92±1.40)％、(7.18±0.57)％,高于其它免疫組(均P＜0.05)；pJME/ICAM-1和pJME+ pICAM-1組DC錶麵CD80和MHCⅡ錶達水平比較差異無統計學意義(P＞0.05)；pJME/ICAM-1與pJME+ pICAM-1組內吞能力明顯增彊,平均熒光彊度分彆為437.11 ±47.60、416.67±29.12,顯著高于其它組(P＜0.05).比較不同免疫原對細胞分裂的作用,以pJME/ICAM-1組最彊,(73.69±7.32)％ CD4+T細胞髮生分裂,(45.40 ±2.57)％CD8 +T細胞髮生分裂,顯著高于對照組(P＜0.05).結論:ICAM-1編碼基因能夠促進JE DNA疫苗脾髒樹突狀細胞的成熟,能夠提供獨立或放大B7分子的協同刺激信號.
목적:연구세포간점부분자1(ICAM-1)편마기인대일본뇌염(JE) DNA역묘비장수돌상세포공능적영향.방법:투식RT-PCR법획취BALB/c서ICAM-1편마기인,구건중조자pJME/ICAM-1화pICAM-1,지질체법전염상술질립우CHO세포,Western blot법검측전염적CHO세포중목적단백표체.실험분5조,포괄:pJME/ICAM-1、pJME+ PICAM-1、pJME、JE멸활역묘화pcDNA3.1(+)면역조,이불동면역원기주면역BALB/c소서,류식세포의검측경불동면역원면역서후비장DC표형、항원탄서공능이급혼합림파세포반응.결과:융합표체중조질립pJME/ICAM-1화단질립pICAM-1경감정구건정학.pJME/ICAM-1조CD11c+CD86+ DC화CD11c+ICAM-1+ DC비례분별위(6.92±1.40)％、(7.18±0.57)％,고우기타면역조(균P＜0.05)；pJME/ICAM-1화pJME+ pICAM-1조DC표면CD80화MHCⅡ표체수평비교차이무통계학의의(P＞0.05)；pJME/ICAM-1여pJME+ pICAM-1조내탄능력명현증강,평균형광강도분별위437.11 ±47.60、416.67±29.12,현저고우기타조(P＜0.05).비교불동면역원대세포분렬적작용,이pJME/ICAM-1조최강,(73.69±7.32)％ CD4+T세포발생분렬,(45.40 ±2.57)％CD8 +T세포발생분렬,현저고우대조조(P＜0.05).결론:ICAM-1편마기인능구촉진JE DNA역묘비장수돌상세포적성숙,능구제공독립혹방대B7분자적협동자격신호.
