国际眼科杂志
國際眼科雜誌
국제안과잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY
2013年
5期
850-853
,共4页
缺氧%视网膜前体细胞%血管内皮生长因子%CoCl2
缺氧%視網膜前體細胞%血管內皮生長因子%CoCl2
결양%시망막전체세포%혈관내피생장인자%CoCl2
目的:探讨氯化钴(CoCl2) 模拟缺氧环境下对大鼠视网膜前体细胞(RPCs)中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF) 基因表达及蛋白分泌的影响.方法:全神经球贴壁法分离、培养、鉴定RPCs.应用RT-PCR及ELISA,检测不同浓度 CoCl2(0,50,100,150,200μmol/L)干预24h后RPCs中VEGF表达的变化,检测150μmol/L CoCl2作用不同时间(0,12,24,36,48,72h)RPCs中VEGF表达的变化.结果:全神经球贴壁法培养的RPCs高表达神经干细胞特异性标记(Nestin),自然分化后表达视网膜细胞标志性抗原Rhodopsine,MAP-2和GFAP,在缺氧培养时间相同的情况下,VEGF 基因的表达随着 CoCl2浓度的增加而逐渐增加而后降低,CoCl2为150μmol/L时达到峰值(P≤0.05).当 CoCl2浓度为150μmol/L培养不同时间时,随着缺氧干预时间的延长,VEGF基因的表达亦是逐渐增加而后降低,于36h时达到峰值(P≤0.05),蛋白与基因表达的变化基本一致.结论:全神经球贴壁法培养RPCs能较好地表达其干细胞特性.CoCl2模拟缺氧环境下,缺氧使 RPCs中VEGF 的分泌增强并具有时间和剂量依赖性.
目的:探討氯化鈷(CoCl2) 模擬缺氧環境下對大鼠視網膜前體細胞(RPCs)中血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF) 基因錶達及蛋白分泌的影響.方法:全神經毬貼壁法分離、培養、鑒定RPCs.應用RT-PCR及ELISA,檢測不同濃度 CoCl2(0,50,100,150,200μmol/L)榦預24h後RPCs中VEGF錶達的變化,檢測150μmol/L CoCl2作用不同時間(0,12,24,36,48,72h)RPCs中VEGF錶達的變化.結果:全神經毬貼壁法培養的RPCs高錶達神經榦細胞特異性標記(Nestin),自然分化後錶達視網膜細胞標誌性抗原Rhodopsine,MAP-2和GFAP,在缺氧培養時間相同的情況下,VEGF 基因的錶達隨著 CoCl2濃度的增加而逐漸增加而後降低,CoCl2為150μmol/L時達到峰值(P≤0.05).噹 CoCl2濃度為150μmol/L培養不同時間時,隨著缺氧榦預時間的延長,VEGF基因的錶達亦是逐漸增加而後降低,于36h時達到峰值(P≤0.05),蛋白與基因錶達的變化基本一緻.結論:全神經毬貼壁法培養RPCs能較好地錶達其榦細胞特性.CoCl2模擬缺氧環境下,缺氧使 RPCs中VEGF 的分泌增彊併具有時間和劑量依賴性.
목적:탐토록화고(CoCl2) 모의결양배경하대대서시망막전체세포(RPCs)중혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF) 기인표체급단백분비적영향.방법:전신경구첩벽법분리、배양、감정RPCs.응용RT-PCR급ELISA,검측불동농도 CoCl2(0,50,100,150,200μmol/L)간예24h후RPCs중VEGF표체적변화,검측150μmol/L CoCl2작용불동시간(0,12,24,36,48,72h)RPCs중VEGF표체적변화.결과:전신경구첩벽법배양적RPCs고표체신경간세포특이성표기(Nestin),자연분화후표체시망막세포표지성항원Rhodopsine,MAP-2화GFAP,재결양배양시간상동적정황하,VEGF 기인적표체수착 CoCl2농도적증가이축점증가이후강저,CoCl2위150μmol/L시체도봉치(P≤0.05).당 CoCl2농도위150μmol/L배양불동시간시,수착결양간예시간적연장,VEGF기인적표체역시축점증가이후강저,우36h시체도봉치(P≤0.05),단백여기인표체적변화기본일치.결론:전신경구첩벽법배양RPCs능교호지표체기간세포특성.CoCl2모의결양배경하,결양사 RPCs중VEGF 적분비증강병구유시간화제량의뢰성.
