医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2014年
4期
71-75
,共5页
程婷婷%徐希%葛杭萍%陈枫煜%梁彬%俞康
程婷婷%徐希%葛杭萍%陳楓煜%樑彬%俞康
정정정%서희%갈항평%진풍욱%량빈%유강
树突状细胞%自杀基因%慢病毒%胸腺激酶%更昔洛韦
樹突狀細胞%自殺基因%慢病毒%胸腺激酶%更昔洛韋
수돌상세포%자살기인%만병독%흉선격매%경석락위
Dendritic cells%Suicide gene%Lentivirus%Thymidine kinase%Ganciclovir
目的 探讨慢病毒介导的自杀基因胸腺激酶(TK)对小鼠树突状细胞(DC)的杀伤作用.方法 构建含自杀基因TK的慢病毒载体质粒,转染树突状细胞后通过更昔洛韦激活自杀基因使细胞死亡.结果 阳性重组质粒酶切及测序鉴定与预期结果相符,成功构建其真核表达载体.收集含自杀基因的慢病毒,测其效价为2×109TU/ml,达到实验要求.慢病毒转染树突状细胞后,观察树突状细胞的形态、大小及数量与对照组比较无明显差异,经流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)表达率为96.43％.CCK-8法检测发现,树突状细胞随着更昔洛韦药物浓度的增加,细胞凋亡率逐渐上升.药物浓度100μ g/ml作用时间48h时,为药物对细胞的最佳杀伤作用时间;更昔洛韦该药物对正常的树突状细胞未发现有毒性作用.结论 慢病毒介导的自杀基因TK对小鼠树突状细胞具有显著的杀伤作用.
目的 探討慢病毒介導的自殺基因胸腺激酶(TK)對小鼠樹突狀細胞(DC)的殺傷作用.方法 構建含自殺基因TK的慢病毒載體質粒,轉染樹突狀細胞後通過更昔洛韋激活自殺基因使細胞死亡.結果 暘性重組質粒酶切及測序鑒定與預期結果相符,成功構建其真覈錶達載體.收集含自殺基因的慢病毒,測其效價為2×109TU/ml,達到實驗要求.慢病毒轉染樹突狀細胞後,觀察樹突狀細胞的形態、大小及數量與對照組比較無明顯差異,經流式細胞儀檢測綠色熒光蛋白(GFP)錶達率為96.43％.CCK-8法檢測髮現,樹突狀細胞隨著更昔洛韋藥物濃度的增加,細胞凋亡率逐漸上升.藥物濃度100μ g/ml作用時間48h時,為藥物對細胞的最佳殺傷作用時間;更昔洛韋該藥物對正常的樹突狀細胞未髮現有毒性作用.結論 慢病毒介導的自殺基因TK對小鼠樹突狀細胞具有顯著的殺傷作用.
목적 탐토만병독개도적자살기인흉선격매(TK)대소서수돌상세포(DC)적살상작용.방법 구건함자살기인TK적만병독재체질립,전염수돌상세포후통과경석락위격활자살기인사세포사망.결과 양성중조질립매절급측서감정여예기결과상부,성공구건기진핵표체재체.수집함자살기인적만병독,측기효개위2×109TU/ml,체도실험요구.만병독전염수돌상세포후,관찰수돌상세포적형태、대소급수량여대조조비교무명현차이,경류식세포의검측록색형광단백(GFP)표체솔위96.43％.CCK-8법검측발현,수돌상세포수착경석락위약물농도적증가,세포조망솔축점상승.약물농도100μ g/ml작용시간48h시,위약물대세포적최가살상작용시간;경석락위해약물대정상적수돌상세포미발현유독성작용.결론 만병독개도적자살기인TK대소서수돌상세포구유현저적살상작용.
