现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2013年
10期
2151-2154
,共4页
李旭%李岩%程世孝%李雷明%孟凡贺%王立国%王君%范广宇
李旭%李巖%程世孝%李雷明%孟凡賀%王立國%王君%範廣宇
리욱%리암%정세효%리뢰명%맹범하%왕입국%왕군%범엄우
曲古抑菌素A%尤文肉瘤%p53%凋亡
麯古抑菌素A%尤文肉瘤%p53%凋亡
곡고억균소A%우문육류%p53%조망
TSA%Ewing's sarcoma%p53%apoptosis
目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)诱导尤文肉瘤细胞株WE-68和VH-64凋亡及作用机制.方法:四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)测定细胞增殖抑制率.流式细胞计数法测量TSA给药后细胞周期中sub-G1含量的变化.免疫印迹法(Western-blot)检测细胞中活化型多聚ADP核糖多聚酶(cleaved-PARP),p53-lys382残基乙酰化和p53蛋白总量的表达.实时定量PCR和siRNA转染技术测定p53多个下游基因的mRNA水平改变和p53表达下调对TSA诱导凋亡的影响.结果:TSA抑制了尤文肉瘤细胞的增殖,诱导细胞周期中sub-G1含量和凋亡终产物cleaved-PARP蛋白表达的增加.TSA给药后,p53-lys382残基乙酰化表达量呈浓度依存性增加,同时上调p53下游因子p21,mdm2,Bax和PUMA的mRNA水平.另一方面,p53蛋白表达的下调明显削弱了TSA介导的p21表达的上调和cleaved-PARP的产生.结论:组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA能够通过激活p53高乙酰化表达来恢复p53转录功能,从而诱导尤文肉瘤细胞株产生凋亡.
目的:探討組蛋白去乙酰化酶抑製劑麯古抑菌素A(trichostatin A,TSA)誘導尤文肉瘤細胞株WE-68和VH-64凋亡及作用機製.方法:四甲基偶氮唑藍法(MTT法)測定細胞增殖抑製率.流式細胞計數法測量TSA給藥後細胞週期中sub-G1含量的變化.免疫印跡法(Western-blot)檢測細胞中活化型多聚ADP覈糖多聚酶(cleaved-PARP),p53-lys382殘基乙酰化和p53蛋白總量的錶達.實時定量PCR和siRNA轉染技術測定p53多箇下遊基因的mRNA水平改變和p53錶達下調對TSA誘導凋亡的影響.結果:TSA抑製瞭尤文肉瘤細胞的增殖,誘導細胞週期中sub-G1含量和凋亡終產物cleaved-PARP蛋白錶達的增加.TSA給藥後,p53-lys382殘基乙酰化錶達量呈濃度依存性增加,同時上調p53下遊因子p21,mdm2,Bax和PUMA的mRNA水平.另一方麵,p53蛋白錶達的下調明顯削弱瞭TSA介導的p21錶達的上調和cleaved-PARP的產生.結論:組蛋白去乙酰化酶抑製劑TSA能夠通過激活p53高乙酰化錶達來恢複p53轉錄功能,從而誘導尤文肉瘤細胞株產生凋亡.
목적:탐토조단백거을선화매억제제곡고억균소A(trichostatin A,TSA)유도우문육류세포주WE-68화VH-64조망급작용궤제.방법:사갑기우담서람법(MTT법)측정세포증식억제솔.류식세포계수법측량TSA급약후세포주기중sub-G1함량적변화.면역인적법(Western-blot)검측세포중활화형다취ADP핵당다취매(cleaved-PARP),p53-lys382잔기을선화화p53단백총량적표체.실시정량PCR화siRNA전염기술측정p53다개하유기인적mRNA수평개변화p53표체하조대TSA유도조망적영향.결과:TSA억제료우문육류세포적증식,유도세포주기중sub-G1함량화조망종산물cleaved-PARP단백표체적증가.TSA급약후,p53-lys382잔기을선화표체량정농도의존성증가,동시상조p53하유인자p21,mdm2,Bax화PUMA적mRNA수평.령일방면,p53단백표체적하조명현삭약료TSA개도적p21표체적상조화cleaved-PARP적산생.결론:조단백거을선화매억제제TSA능구통과격활p53고을선화표체래회복p53전록공능,종이유도우문육류세포주산생조망.
