青海师范大学学报（自然科学版）
青海師範大學學報（自然科學版）
청해사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF QINGHAI NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2014年
1期
41-46
,共6页
徐永涛%马建滨%周智红%谭春敏%张湑泽%郭松长%都玉蓉
徐永濤%馬建濱%週智紅%譚春敏%張湑澤%郭鬆長%都玉蓉
서영도%마건빈%주지홍%담춘민%장서택%곽송장%도옥용
藏羚羊%微卫星%富集文库%(AAC)8探针%引物筛选
藏羚羊%微衛星%富集文庫%(AAC)8探針%引物篩選
장령양%미위성%부집문고%(AAC)8탐침%인물사선
基于磁珠富集法,利用生物素标记的寡核苷酸探针(AAC)8从藏羚羊(Tibetan antelope)基因组酶切的300～1000bp片段中筛选微卫星位点,纯化的富集片段连接到pCR@2.1载体和转化到Trans5α感受态细胞.随机挑取180个白斑克隆,PCR检测到条带数大于或等于2的阳性克隆为5 6个,阳性率为31.1％.对阳性克隆测序,获得43条含微卫星座位的序列,微卫星重复次数在5～20次之间.舍弃不适宜设计引物的微卫星座位,试验设计并合成了20对微卫星引物;以3个样点(青海、新疆、西藏)的24个藏羚羊基因组为模板进行PCR扩增,获得8对可得到稳定扩增产物的微卫星引物,其中4对引物的扩增产物具有多态性,座位分别为AAC050、AAC05 6、AAC1 65和AAC477.上述引物可用于藏羚羊及近缘物种的遗传多样性、种群遗传结构等研究.
基于磁珠富集法,利用生物素標記的寡覈苷痠探針(AAC)8從藏羚羊(Tibetan antelope)基因組酶切的300～1000bp片段中篩選微衛星位點,純化的富集片段連接到pCR@2.1載體和轉化到Trans5α感受態細胞.隨機挑取180箇白斑剋隆,PCR檢測到條帶數大于或等于2的暘性剋隆為5 6箇,暘性率為31.1％.對暘性剋隆測序,穫得43條含微衛星座位的序列,微衛星重複次數在5～20次之間.捨棄不適宜設計引物的微衛星座位,試驗設計併閤成瞭20對微衛星引物;以3箇樣點(青海、新疆、西藏)的24箇藏羚羊基因組為模闆進行PCR擴增,穫得8對可得到穩定擴增產物的微衛星引物,其中4對引物的擴增產物具有多態性,座位分彆為AAC050、AAC05 6、AAC1 65和AAC477.上述引物可用于藏羚羊及近緣物種的遺傳多樣性、種群遺傳結構等研究.
기우자주부집법,이용생물소표기적과핵감산탐침(AAC)8종장령양(Tibetan antelope)기인조매절적300～1000bp편단중사선미위성위점,순화적부집편단련접도pCR@2.1재체화전화도Trans5α감수태세포.수궤도취180개백반극륭,PCR검측도조대수대우혹등우2적양성극륭위5 6개,양성솔위31.1％.대양성극륭측서,획득43조함미위성좌위적서렬,미위성중복차수재5～20차지간.사기불괄의설계인물적미위성좌위,시험설계병합성료20대미위성인물;이3개양점(청해、신강、서장)적24개장령양기인조위모판진행PCR확증,획득8대가득도은정확증산물적미위성인물,기중4대인물적확증산물구유다태성,좌위분별위AAC050、AAC05 6、AAC1 65화AAC477.상술인물가용우장령양급근연물충적유전다양성、충군유전결구등연구.
