广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
14期
144-146,150
,共4页
李紫聪%张茂%许惠%刘德武%吴珍芳
李紫聰%張茂%許惠%劉德武%吳珍芳
리자총%장무%허혜%류덕무%오진방
β-甘露聚糖酶%manA基因%转基因小鼠
β-甘露聚糖酶%manA基因%轉基因小鼠
β-감로취당매%manA기인%전기인소서
为了获得β-甘露聚糖酶基因manA的转基因小鼠,从黑曲霉中克隆得到β-甘露聚糖酶基因manA,进行体外表达检测甘露聚糖酶活性后,将此基因插入到含有猪腮腺分泌蛋白(PSP)基因启动子的表达载体pPSPBGPneo中,得到在腮腺组织特异表达β-甘露聚糖酶基因manA的载体pPSP-manA,总长为16.3 kb,将其进行线性化后回收得到高质量DNA片段,通过显微注射得到17只原代小鼠,进行PCR和Southern blot检测发现有6只阳性转基因小鼠,表明转β-甘露聚糖酶基因manA小鼠制备成功.
為瞭穫得β-甘露聚糖酶基因manA的轉基因小鼠,從黑麯黴中剋隆得到β-甘露聚糖酶基因manA,進行體外錶達檢測甘露聚糖酶活性後,將此基因插入到含有豬腮腺分泌蛋白(PSP)基因啟動子的錶達載體pPSPBGPneo中,得到在腮腺組織特異錶達β-甘露聚糖酶基因manA的載體pPSP-manA,總長為16.3 kb,將其進行線性化後迴收得到高質量DNA片段,通過顯微註射得到17隻原代小鼠,進行PCR和Southern blot檢測髮現有6隻暘性轉基因小鼠,錶明轉β-甘露聚糖酶基因manA小鼠製備成功.
위료획득β-감로취당매기인manA적전기인소서,종흑곡매중극륭득도β-감로취당매기인manA,진행체외표체검측감로취당매활성후,장차기인삽입도함유저시선분비단백(PSP)기인계동자적표체재체pPSPBGPneo중,득도재시선조직특이표체β-감로취당매기인manA적재체pPSP-manA,총장위16.3 kb,장기진행선성화후회수득도고질량DNA편단,통과현미주사득도17지원대소서,진행PCR화Southern blot검측발현유6지양성전기인소서,표명전β-감로취당매기인manA소서제비성공.
