江苏大学学报(医学版)
江囌大學學報(醫學版)
강소대학학보(의학판)
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2013年
6期
461-464
,共4页
何亚龙%王晓燕%张尤历%范钰
何亞龍%王曉燕%張尤歷%範鈺
하아룡%왕효연%장우력%범옥
大肠肿瘤%叉头转录因子M1%化疗敏感性%Akt
大腸腫瘤%扠頭轉錄因子M1%化療敏感性%Akt
대장종류%차두전록인자M1%화료민감성%Akt
colon carcinoma%forkhead box protein M1%chemosensitivity%Akt
目的:观察叉头转录因子M1(forkhead box protein M1,FoxM1)基因小干扰RNA (small interfering RNA,siRNA)对大肠癌细胞化疗药物敏感性的影响,并探讨其可能机制.方法:设计合成3个FoxM1 siRNA,转染人大肠癌SW620细胞后,采用定量PCR方法筛选下调FoxM1 mRNA效果最好的siRNA,然后以不同浓度(3.125,6.25,12.5nmol/L)的该siRNA转染处理大肠癌细胞,用RPMI 1640代替FoxM1 siRNA作为空白对照组(Con-A);48 h后,各组细胞分别用伊立替康(Irinotecan,CPT-11,7.5μmol/L)处理,以MTT法检测siRNA转染对各组细胞增殖及对伊立替康敏感性的影响;以蛋白质印迹方法检测Akt磷酸化情况.结果:MTT结果显示,空白对照组、siRNA 3.125 nmol/L组、siRNA 6.25 nmol/L组和siRNA 12.5 nmol/L组SW620细胞生长抑制率分别为18.36%,39.78%,58.18%,78.28%.统计学分析显示,抑制率呈浓度依赖性(r =0.775,P<0.05).蛋白质印迹结果表明,siRNA转染组Akt磷酸化水平明显下调.结论:FoxM1基因siRNA可提高大肠癌细胞化疗敏感性;下调Akt磷酸化水平是其重要机制之一.
目的:觀察扠頭轉錄因子M1(forkhead box protein M1,FoxM1)基因小榦擾RNA (small interfering RNA,siRNA)對大腸癌細胞化療藥物敏感性的影響,併探討其可能機製.方法:設計閤成3箇FoxM1 siRNA,轉染人大腸癌SW620細胞後,採用定量PCR方法篩選下調FoxM1 mRNA效果最好的siRNA,然後以不同濃度(3.125,6.25,12.5nmol/L)的該siRNA轉染處理大腸癌細胞,用RPMI 1640代替FoxM1 siRNA作為空白對照組(Con-A);48 h後,各組細胞分彆用伊立替康(Irinotecan,CPT-11,7.5μmol/L)處理,以MTT法檢測siRNA轉染對各組細胞增殖及對伊立替康敏感性的影響;以蛋白質印跡方法檢測Akt燐痠化情況.結果:MTT結果顯示,空白對照組、siRNA 3.125 nmol/L組、siRNA 6.25 nmol/L組和siRNA 12.5 nmol/L組SW620細胞生長抑製率分彆為18.36%,39.78%,58.18%,78.28%.統計學分析顯示,抑製率呈濃度依賴性(r =0.775,P<0.05).蛋白質印跡結果錶明,siRNA轉染組Akt燐痠化水平明顯下調.結論:FoxM1基因siRNA可提高大腸癌細胞化療敏感性;下調Akt燐痠化水平是其重要機製之一.
목적:관찰차두전록인자M1(forkhead box protein M1,FoxM1)기인소간우RNA (small interfering RNA,siRNA)대대장암세포화료약물민감성적영향,병탐토기가능궤제.방법:설계합성3개FoxM1 siRNA,전염인대장암SW620세포후,채용정량PCR방법사선하조FoxM1 mRNA효과최호적siRNA,연후이불동농도(3.125,6.25,12.5nmol/L)적해siRNA전염처리대장암세포,용RPMI 1640대체FoxM1 siRNA작위공백대조조(Con-A);48 h후,각조세포분별용이립체강(Irinotecan,CPT-11,7.5μmol/L)처리,이MTT법검측siRNA전염대각조세포증식급대이립체강민감성적영향;이단백질인적방법검측Akt린산화정황.결과:MTT결과현시,공백대조조、siRNA 3.125 nmol/L조、siRNA 6.25 nmol/L조화siRNA 12.5 nmol/L조SW620세포생장억제솔분별위18.36%,39.78%,58.18%,78.28%.통계학분석현시,억제솔정농도의뢰성(r =0.775,P<0.05).단백질인적결과표명,siRNA전염조Akt린산화수평명현하조.결론:FoxM1기인siRNA가제고대장암세포화료민감성;하조Akt린산화수평시기중요궤제지일.