CAJ | 학술논문

目的检测P63在正常和畸形胎鼠肛门直肠胚胎发育过程的表达,探讨其表达的意义.方法应用乙烯硫脲(ETU)致畸Wistar孕鼠(n=20),建立肛门直肠畸形动物模型,分别于E13、E14、E15、E16(Ex表示大鼠妊娠第X天)剖宫取胎.正中矢状面连续切片,P63免疫组化染色,连续动态观察P63在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠发育过程中的空间表达情况.通过Western blot和荧光实时定量PCR(qRT-PCR)方法分别研究P63 mRNA和蛋白在正常和畸形大鼠胚胎泄殖腔及肛门直肠的表达.结果免疫组化结果:正常大鼠胚胎中,P63表达于尿直肠隔以及后肠、泄殖腔膜和尿生殖窦的上皮层.肛门直肠畸形组大鼠胚胎中,在E13～E16,P63在尿直肠隔间质、后肠上皮层、泄殖腔膜或瘘管上皮层的表达减弱.Western blot和qRT-PCR定量检测结果:在发育期的后肠中P63蛋白和P63 mRNA的表达表现出时间依赖性,在肛门形成的关键时期,即14d和15d时P63的表达水平达到高峰,一旦肛门形成其表达量随即开始降低,畸形组与正常组比较,P63 mRNA和蛋白的表达在14～15 d明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论在正常大鼠泄殖腔和直肠胚胎发育过程中,P63存在着时空表达不平衡性的特点；在肛门直肠形成的关键时期(13～16 d),先天性肛门直肠畸形大鼠胚胎中P63基因表达下调可能与肛门直肠畸形的发生有关.
목적 검측P63재정상화기형태서항문직장배태발육과정적표체,탐토기표체적의의.방법 응용을희류뇨(ETU)치기Wistar잉서(n=20),건립항문직장기형동물모형,분별우E13、E14、E15、E16(Ex표시대서임신제X천)부궁취태.정중시상면련속절편,P63면역조화염색,련속동태관찰P63재정상화기형대서배태설식강급항문직장발육과정중적공간표체정황.통과Western blot화형광실시정량PCR(qRT-PCR)방법분별연구P63 mRNA화단백재정상화기형대서배태설식강급항문직장적표체.결과 면역조화결과:정상대서배태중,P63표체우뇨직장격이급후장、설식강막화뇨생식두적상피층.항문직장기형조대서배태중,재E13～E16,P63재뇨직장격간질、후장상피층、설식강막혹루관상피층적표체감약.Western blot화qRT-PCR정량검측결과:재발육기적후장중P63단백화P63 mRNA적표체표현출시간의뢰성,재항문형성적관건시기,즉14d화15d시P63적표체수평체도고봉,일단항문형성기표체량수즉개시강저,기형조여정상조비교,P63 mRNA화단백적표체재14～15 d명현강저,차이유통계학의의(P＜0.05).결론 재정상대서설식강화직장배태발육과정중,P63존재착시공표체불평형성적특점；재항문직장형성적관건시기(13～16 d),선천성항문직장기형대서배태중P63기인표체하조가능여항문직장기형적발생유관.