临床消化病杂志
臨床消化病雜誌
림상소화병잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL GASTROENTEROLOGY
2013年
2期
93-97
,共5页
王育蓉%章欢%孙辉%刘沛
王育蓉%章歡%孫輝%劉沛
왕육용%장환%손휘%류패
肝肾综合征%肿瘤坏死因子α%Ⅰ型1,4,5-三磷酸肌醇受体%蛋白激酶C
肝腎綜閤徵%腫瘤壞死因子α%Ⅰ型1,4,5-三燐痠肌醇受體%蛋白激酶C
간신종합정%종류배사인자α%Ⅰ형1,4,5-삼린산기순수체%단백격매C
目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对人肾小球系膜细胞(HMCs) IP3R1蛋白和mRNA表达的影响及PKC在此信号通路中的作用,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过虑下降的发生机制和防治思路提供理论依据.方法 用实时定量PCR和免疫印记法检测IP3R1 mRNA和蛋白表达的情况,并分别用PMA耗竭内源性蛋白激酶C(PKC),PKCα特异性抑制剂Safingol和PKCδ特异性抑制剂Rottlerin及HA-DN-PKCα质粒转染干预上述诱导实验.同时,用免疫印记法检测TNFα对PKCα和p-PKCα表达的影响.用非放射性测活检测TNFα对PKCα的活化及抑制剂对PKCα活化的影响.结果 TNFα作用HMCs后,IP3R1蛋白和mRNA表达均明显增加.PMA,PKCα抑制剂Safingol,HA-DN-PKCα质粒转染均能明显阻断TNFα诱导的IP3R1蛋白的上调,而PKCδ抑制剂Rottlerin无明显阻断作用.TNFα刺激HMCs,各不同时间组总PKCα蛋白表达无明显差异,而TNFα刺激8h p-PKCα蛋白表达明增加.此外,非放射性测活表明TNFα活化PKCα,Safingol可阻断PKCα的活化.结论 TNFα能上调HMCs中IP3R1蛋白及IP3R1mRNA的表达.活化的PKCα在TNFα上调IP3R1的表达中起重要作用.
目的 探討腫瘤壞死因子α(TNFα)對人腎小毬繫膜細胞(HMCs) IP3R1蛋白和mRNA錶達的影響及PKC在此信號通路中的作用,以期為肝腎綜閤徵(HRS)腎小毬濾過慮下降的髮生機製和防治思路提供理論依據.方法 用實時定量PCR和免疫印記法檢測IP3R1 mRNA和蛋白錶達的情況,併分彆用PMA耗竭內源性蛋白激酶C(PKC),PKCα特異性抑製劑Safingol和PKCδ特異性抑製劑Rottlerin及HA-DN-PKCα質粒轉染榦預上述誘導實驗.同時,用免疫印記法檢測TNFα對PKCα和p-PKCα錶達的影響.用非放射性測活檢測TNFα對PKCα的活化及抑製劑對PKCα活化的影響.結果 TNFα作用HMCs後,IP3R1蛋白和mRNA錶達均明顯增加.PMA,PKCα抑製劑Safingol,HA-DN-PKCα質粒轉染均能明顯阻斷TNFα誘導的IP3R1蛋白的上調,而PKCδ抑製劑Rottlerin無明顯阻斷作用.TNFα刺激HMCs,各不同時間組總PKCα蛋白錶達無明顯差異,而TNFα刺激8h p-PKCα蛋白錶達明增加.此外,非放射性測活錶明TNFα活化PKCα,Safingol可阻斷PKCα的活化.結論 TNFα能上調HMCs中IP3R1蛋白及IP3R1mRNA的錶達.活化的PKCα在TNFα上調IP3R1的錶達中起重要作用.
목적 탐토종류배사인자α(TNFα)대인신소구계막세포(HMCs) IP3R1단백화mRNA표체적영향급PKC재차신호통로중적작용,이기위간신종합정(HRS)신소구려과필하강적발생궤제화방치사로제공이론의거.방법 용실시정량PCR화면역인기법검측IP3R1 mRNA화단백표체적정황,병분별용PMA모갈내원성단백격매C(PKC),PKCα특이성억제제Safingol화PKCδ특이성억제제Rottlerin급HA-DN-PKCα질립전염간예상술유도실험.동시,용면역인기법검측TNFα대PKCα화p-PKCα표체적영향.용비방사성측활검측TNFα대PKCα적활화급억제제대PKCα활화적영향.결과 TNFα작용HMCs후,IP3R1단백화mRNA표체균명현증가.PMA,PKCα억제제Safingol,HA-DN-PKCα질립전염균능명현조단TNFα유도적IP3R1단백적상조,이PKCδ억제제Rottlerin무명현조단작용.TNFα자격HMCs,각불동시간조총PKCα단백표체무명현차이,이TNFα자격8h p-PKCα단백표체명증가.차외,비방사성측활표명TNFα활화PKCα,Safingol가조단PKCα적활화.결론 TNFα능상조HMCs중IP3R1단백급IP3R1mRNA적표체.활화적PKCα재TNFα상조IP3R1적표체중기중요작용.
