北京大学学报（医学版）
北京大學學報（醫學版）
북경대학학보（의학판）
JOURNAL OF BEIJING MEDICAL UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2013年
2期
274-279
,共6页
邹晓英%庄姮%岳林%高学军
鄒曉英%莊姮%嶽林%高學軍
추효영%장항%악림%고학군
牙髓%细胞,培养的%信号传导%细胞增殖
牙髓%細胞,培養的%信號傳導%細胞增殖
아수%세포,배양적%신호전도%세포증식
目的:探讨γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸t-丁酯{N-[N-(3,5-difluorophena-cetyl-L-alanyl)]-S-phenylglycine t-butyl ester,DAPT}对人牙髓细胞Notch信号通路是否有抑制作用,及对牙髓细胞增殖能力的影响.方法:收集临床上完整拔除的健康前磨牙或第三磨牙,采用酶消化法进行人牙髓细胞的原代培养和传代培养.从第4代开始在正常培养基中加入终浓度为5μmol/L的γ-分泌酶抑制剂DAPT,选择第4、8、10代细胞为检测细胞,采用实时荧光定量RT-PCR方法和基因芯片检测Notch信号通路相关基因的表达变化,用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定细胞活性,绘制牙髓细胞增殖曲线,评价牙髓细胞的增殖状况.结果:加入DAPT后,实验组牙髓细胞Notch信号通路的下游基因Hes1、Hey1、NR4A2表达下降,同时,第8、10代牙髓细胞的增殖减慢,与对照组相比,差异有统计学意义.结论:γ-分泌酶抑制剂DAPT能有效抑制体外培养人牙髓细胞的Notch信号通路,使人牙髓细胞增殖减慢,影响细胞的正常生命周期.
目的:探討γ-分泌酶抑製劑3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨痠t-丁酯{N-[N-(3,5-difluorophena-cetyl-L-alanyl)]-S-phenylglycine t-butyl ester,DAPT}對人牙髓細胞Notch信號通路是否有抑製作用,及對牙髓細胞增殖能力的影響.方法:收集臨床上完整拔除的健康前磨牙或第三磨牙,採用酶消化法進行人牙髓細胞的原代培養和傳代培養.從第4代開始在正常培養基中加入終濃度為5μmol/L的γ-分泌酶抑製劑DAPT,選擇第4、8、10代細胞為檢測細胞,採用實時熒光定量RT-PCR方法和基因芯片檢測Notch信號通路相關基因的錶達變化,用四甲基偶氮唑鹽(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法測定細胞活性,繪製牙髓細胞增殖麯線,評價牙髓細胞的增殖狀況.結果:加入DAPT後,實驗組牙髓細胞Notch信號通路的下遊基因Hes1、Hey1、NR4A2錶達下降,同時,第8、10代牙髓細胞的增殖減慢,與對照組相比,差異有統計學意義.結論:γ-分泌酶抑製劑DAPT能有效抑製體外培養人牙髓細胞的Notch信號通路,使人牙髓細胞增殖減慢,影響細胞的正常生命週期.
목적:탐토γ-분비매억제제3,5-이불분을선-L-병안선-S-분기감안산t-정지{N-[N-(3,5-difluorophena-cetyl-L-alanyl)]-S-phenylglycine t-butyl ester,DAPT}대인아수세포Notch신호통로시부유억제작용,급대아수세포증식능력적영향.방법:수집림상상완정발제적건강전마아혹제삼마아,채용매소화법진행인아수세포적원대배양화전대배양.종제4대개시재정상배양기중가입종농도위5μmol/L적γ-분비매억제제DAPT,선택제4、8、10대세포위검측세포,채용실시형광정량RT-PCR방법화기인심편검측Notch신호통로상관기인적표체변화,용사갑기우담서염(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)법측정세포활성,회제아수세포증식곡선,평개아수세포적증식상황.결과:가입DAPT후,실험조아수세포Notch신호통로적하유기인Hes1、Hey1、NR4A2표체하강,동시,제8、10대아수세포적증식감만,여대조조상비,차이유통계학의의.결론:γ-분비매억제제DAPT능유효억제체외배양인아수세포적Notch신호통로,사인아수세포증식감만,영향세포적정상생명주기.
