实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2012年
9期
1398-1400
,共3页
李运雄%孟锦绣%朱平%卢聪%郑少忆%余细勇
李運雄%孟錦繡%硃平%盧聰%鄭少憶%餘細勇
리운웅%맹금수%주평%로총%정소억%여세용
风湿性心脏病%噬菌体表达文库%构建
風濕性心髒病%噬菌體錶達文庫%構建
풍습성심장병%서균체표체문고%구건
目的:构建风湿性心脏病患者心脏组织噬菌体表达文库.方法:外科手术治疗中取风湿性心脏病患者新鲜心耳组织,用QIAGEN试剂盒提取RNA,用逆转录酶合成cDNA第一链,用长距离PCR合成双链cDNA,SfiⅠ酶切cDNA后过柱分级收集,用T4 DNA连接酶重组连接入λTriplEx2载体,最后用λ噬菌体包装后构建成原始文库,用PCR、X-gal等方法进行文库质量鉴定.结果:构建了风湿性心脏病心肌组织噬菌体表达文库,原始文库滴度为3.3×106 pfu/mL,重组率为99％,81.25％外源重组片段大于1 kb.结论:成功构建了高质量的风湿性心脏病患者心肌组织噬菌体表达文库,为风湿性心脏病的分子机制寻找新的研究策略奠定了实验基础.
目的:構建風濕性心髒病患者心髒組織噬菌體錶達文庫.方法:外科手術治療中取風濕性心髒病患者新鮮心耳組織,用QIAGEN試劑盒提取RNA,用逆轉錄酶閤成cDNA第一鏈,用長距離PCR閤成雙鏈cDNA,SfiⅠ酶切cDNA後過柱分級收集,用T4 DNA連接酶重組連接入λTriplEx2載體,最後用λ噬菌體包裝後構建成原始文庫,用PCR、X-gal等方法進行文庫質量鑒定.結果:構建瞭風濕性心髒病心肌組織噬菌體錶達文庫,原始文庫滴度為3.3×106 pfu/mL,重組率為99％,81.25％外源重組片段大于1 kb.結論:成功構建瞭高質量的風濕性心髒病患者心肌組織噬菌體錶達文庫,為風濕性心髒病的分子機製尋找新的研究策略奠定瞭實驗基礎.
목적:구건풍습성심장병환자심장조직서균체표체문고.방법:외과수술치료중취풍습성심장병환자신선심이조직,용QIAGEN시제합제취RNA,용역전록매합성cDNA제일련,용장거리PCR합성쌍련cDNA,SfiⅠ매절cDNA후과주분급수집,용T4 DNA련접매중조련접입λTriplEx2재체,최후용λ서균체포장후구건성원시문고,용PCR、X-gal등방법진행문고질량감정.결과:구건료풍습성심장병심기조직서균체표체문고,원시문고적도위3.3×106 pfu/mL,중조솔위99％,81.25％외원중조편단대우1 kb.결론:성공구건료고질량적풍습성심장병환자심기조직서균체표체문고,위풍습성심장병적분자궤제심조신적연구책략전정료실험기출.
