安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
13期
3902-3906
,共5页
董虎%郭慧琛%敖大%韩世充%闫丹%刘湘涛%孙世琪
董虎%郭慧琛%敖大%韓世充%閆丹%劉湘濤%孫世琪
동호%곽혜침%오대%한세충%염단%류상도%손세기
口蹄疫病毒%原核表达%GH-loop%嵌合型病毒样颗粒
口蹄疫病毒%原覈錶達%GH-loop%嵌閤型病毒樣顆粒
구제역병독%원핵표체%GH-loop%감합형병독양과립
Foot and mouth disease%Prokaryotic expression%GH-loop%Chimeric virus-like particles
[目的]为研究和制备多联或多价口蹄疫病毒样颗粒疫苗奠定基础.[方法]将FLAG序列通过融合PCR技术插入口蹄疫结构蛋白VP1GH-loop可变区,并通过大肠杆菌原核表达技术表达口蹄疫病毒衣壳蛋白VP0、VP3和嵌合型VP1,在体外组装出嵌合FLAG外源多肽的口蹄疫病毒样颗粒.[结果]大肠杆菌表达的口蹄疫衣壳蛋白主要以可溶性存在,在缓冲体系中融合标签被切除衣壳蛋白VP0、VP3和FLAGVP1组装成病毒样颗粒,其大小约25 nm左右.FLAG序列成功插入GH-loop可变区第150-151氨基酸位点之间,外源多肽的插入没有影响衣壳蛋白VP1的空间结构.[结论]口蹄疫loop可变区引入外源抗原是可行的,但外源多肽的大小及理化性质会影响病毒样颗粒的组装效率.
[目的]為研究和製備多聯或多價口蹄疫病毒樣顆粒疫苗奠定基礎.[方法]將FLAG序列通過融閤PCR技術插入口蹄疫結構蛋白VP1GH-loop可變區,併通過大腸桿菌原覈錶達技術錶達口蹄疫病毒衣殼蛋白VP0、VP3和嵌閤型VP1,在體外組裝齣嵌閤FLAG外源多肽的口蹄疫病毒樣顆粒.[結果]大腸桿菌錶達的口蹄疫衣殼蛋白主要以可溶性存在,在緩遲體繫中融閤標籤被切除衣殼蛋白VP0、VP3和FLAGVP1組裝成病毒樣顆粒,其大小約25 nm左右.FLAG序列成功插入GH-loop可變區第150-151氨基痠位點之間,外源多肽的插入沒有影響衣殼蛋白VP1的空間結構.[結論]口蹄疫loop可變區引入外源抗原是可行的,但外源多肽的大小及理化性質會影響病毒樣顆粒的組裝效率.
[목적]위연구화제비다련혹다개구제역병독양과립역묘전정기출.[방법]장FLAG서렬통과융합PCR기술삽입구제역결구단백VP1GH-loop가변구,병통과대장간균원핵표체기술표체구제역병독의각단백VP0、VP3화감합형VP1,재체외조장출감합FLAG외원다태적구제역병독양과립.[결과]대장간균표체적구제역의각단백주요이가용성존재,재완충체계중융합표첨피절제의각단백VP0、VP3화FLAGVP1조장성병독양과립,기대소약25 nm좌우.FLAG서렬성공삽입GH-loop가변구제150-151안기산위점지간,외원다태적삽입몰유영향의각단백VP1적공간결구.[결론]구제역loop가변구인입외원항원시가행적,단외원다태적대소급이화성질회영향병독양과립적조장효솔.
