内蒙古中医药
內矇古中醫藥
내몽고중의약
INNER MONGOL JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
2014年
6期
127-129
,共3页
丹参%DNA甲基化%MSAP
丹參%DNA甲基化%MSAP
단삼%DNA갑기화%MSAP
以丹参叶片为材料,利用MSAP技术检测丹参基因组DNA甲基化差异,对MSAP体系中的预扩增、选择性扩增体系及电泳时间进行了优化.结果表明MSAP最佳反应体系为酶切反应:HpaⅡ/MspI 10U,EcoR I 10 U;最佳预扩增体系为25μL反应体系中,含rTaq酶0.2μL、Mg2+ 2.0μL、模板DNA 2.0μL、dNTPs 2.0μL和上下游引物E00/HM00各1.5μL;最佳选择性扩增体系为25μL体系中,含rTaq酶0.2μL、Mg2+ 2.0μL、预扩增稀释100倍产物2.0μL、dNTPs 2.0μL和上下游引物各1.0μL;最佳电泳时间为5h.该检测方法方便快捷,为进一步深入研究分析丹参DNA甲基化地域差异奠定了基础.
以丹參葉片為材料,利用MSAP技術檢測丹參基因組DNA甲基化差異,對MSAP體繫中的預擴增、選擇性擴增體繫及電泳時間進行瞭優化.結果錶明MSAP最佳反應體繫為酶切反應:HpaⅡ/MspI 10U,EcoR I 10 U;最佳預擴增體繫為25μL反應體繫中,含rTaq酶0.2μL、Mg2+ 2.0μL、模闆DNA 2.0μL、dNTPs 2.0μL和上下遊引物E00/HM00各1.5μL;最佳選擇性擴增體繫為25μL體繫中,含rTaq酶0.2μL、Mg2+ 2.0μL、預擴增稀釋100倍產物2.0μL、dNTPs 2.0μL和上下遊引物各1.0μL;最佳電泳時間為5h.該檢測方法方便快捷,為進一步深入研究分析丹參DNA甲基化地域差異奠定瞭基礎.
이단삼협편위재료,이용MSAP기술검측단삼기인조DNA갑기화차이,대MSAP체계중적예확증、선택성확증체계급전영시간진행료우화.결과표명MSAP최가반응체계위매절반응:HpaⅡ/MspI 10U,EcoR I 10 U;최가예확증체계위25μL반응체계중,함rTaq매0.2μL、Mg2+ 2.0μL、모판DNA 2.0μL、dNTPs 2.0μL화상하유인물E00/HM00각1.5μL;최가선택성확증체계위25μL체계중,함rTaq매0.2μL、Mg2+ 2.0μL、예확증희석100배산물2.0μL、dNTPs 2.0μL화상하유인물각1.0μL;최가전영시간위5h.해검측방법방편쾌첩,위진일보심입연구분석단삼DNA갑기화지역차이전정료기출.
