迁移侵袭抑制蛋白MIIP基因K167E位点突变体的构建和表达
천이침습억제단백MIIP기인K167E위점돌변체적구건화표체
Construction and prokaryotic expression of migration and invasion inhibitor protein plasmid with K167E point mutation
  • 万方数据
    宁夏医学杂志 저하의학잡지
    NINGXIA MEDICAL JOURNAL
    2014年 1期 7-10 ,共4页

    高玉婧%马晓东%芦晓红%姚青%裴秀英%杨怡%李建宁%张茜%孙玉宁

    고옥청%마효동%호효홍%요청%배수영%양이%리건저%장천%손옥저

    pGEX-4T-1-MIIP%GST-MIIP%突变%原核表达%融合蛋白 pGEX-4T-1-MIIP%GST-MIIP%突變%原覈錶達%融閤蛋白
    pGEX-4T-1-MIIP%GST-MIIP%돌변%원핵표체%융합단백
    目的 构建人迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)蛋白K167E突变体的原核表达载体pGEX-4T-1-MIIP(K167E)并进行表达和纯化,为MIIP的后续功能研究提供有效工具.方法 以pGEX-4T-1-MIIP重组质粒为模板,PCR扩增得到人MIIP基因(K167E)突变体的cDNA全长,将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建获得pGEX-4T-1-MIIP(K167E)突变体,经酶切鉴定及测序验证完全正确后,将其转化至大肠杆菌BL21细胞中诱导表达,纯化获得GST-MIIP(K167E)融合蛋白.结果 酶切鉴定和测序结果显示,pGEX-4T-1-MIIP(K167E)突变体表达载体构建成功.经诱导表达及纯化后,成功获得的GST-MIIP(K167E)融合蛋白.结论 成功构建了pGEX-4T-1-MIIP(K167E)突变体表达载体,并获得了GST-MIIP(K167E)融合蛋白.
    목적 구건인천이침습억제단백(MIIP)단백K167E돌변체적원핵표체재체pGEX-4T-1-MIIP(K167E)병진행표체화순화,위MIIP적후속공능연구제공유효공구.방법 이pGEX-4T-1-MIIP중조질립위모판,PCR확증득도인MIIP기인(K167E)돌변체적cDNA전장,장기극륭지원핵표체재체pGEX-4T-1,구건획득pGEX-4T-1-MIIP(K167E)돌변체,경매절감정급측서험증완전정학후,장기전화지대장간균BL21세포중유도표체,순화획득GST-MIIP(K167E)융합단백.결과 매절감정화측서결과현시,pGEX-4T-1-MIIP(K167E)돌변체표체재체구건성공.경유도표체급순화후,성공획득적GST-MIIP(K167E)융합단백.결론 성공구건료pGEX-4T-1-MIIP(K167E)돌변체표체재체,병획득료GST-MIIP(K167E)융합단백.
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